INPA   24560
UNIDAD EJECUTORA DE INVESTIGACIONES EN PRODUCCION ANIMAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Estatus oxidativo y actividad mitocondrial de ovocitos bovinos madurados in vitro y vitrificados
Autor/es:
CETICA PABLO; GADZE TOMAS; GUTNISKY CYNTHIA; DALVIT GABRIEL
Reunión:
Jornada; VI Jornadas de Jóvenes Investigadores; 2016
Institución organizadora:
Facultad de Ciencias Veterinarias- UBA
Resumen:
En la actualidad el congelamiento lento de embriones es el método más utilizado de criopreservación, con escaso éxito para ovocitos. Esto convierte a la vitrificación en una alternativa posible, aunque aún no sea usada de rutina en esta especie. El objetivo del trabajo fue estudiar el estatus oxidativo y la actividad mitocondrial de ovocitos bovinos madurados in vitro y luego vitrificados y atemperados. Los complejos ovocito-cumulus (COCs) se obtuvieron por punción aspiración de ovarios provenientes de vacas de faena y se seleccionaron bajo lupa estereoscópica aquellos COCs con cumulus denso y compacto. Los mismos fueron madurados in vitro en medio 199 suplementado con suero fetal bovino (SFB), FSH + LH y gentamicina bajo una atmosfera humidificada con 5 % CO2 durante 22 horas. Finalizada la maduración se denudaron mecánicamente y se dividieron en dos grupos: control (C) y vitrificados (V). El grupo V fue vitrificado a las 22 hs de maduración y luego atemperado utilizando el método de Cryotech®. A ambos grupos se le realizaron determinaciones de estatus oxidativo y actividad mitocondrial a las 0, 3 y 21 hs (H0, H3, H21), post-maduración. El status oxidativo y las mitocondrias activas de los ovocitos se determinó por la coloración fluorescente dual de RedoxSensor Red CC-1 y MitoTracker Green FM. Fueron evaluados entre 22 y 32 COCs por tratamiento y tiempo. En el grupo C se observó un incremento significativo en el status oxidativo (H0:1,53x106, H3:2,19x6 y H21: 2,34x106 unidades arbitrarias/ovocito vs. V: H0:1,68x106, H3:1,4x106 y H21: 1,62x106 unidades arbitrarias/ovocito) y las mitocondrias activas con el aumento del tiempo de evaluación (C: H0: 1.04x107, H3: 1,19x107y H21: 1,46x107 unidades arbitrarias/ovocito vs. V H0: 1,72x107, H3: 1,4x106 y H21: 1,62x106 unidades arbitrarias/ovocito (p