INPA   24560
UNIDAD EJECUTORA DE INVESTIGACIONES EN PRODUCCION ANIMAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
LA INSULINA NO PARTICIPARÍA EN LA INCORPORACIÓN DE GLUCOSA AL COMPLEJO OVOCITO-CUMULUS DURANTE LA MADURACIÓN IN VITRO
Autor/es:
EVELIN ELIA; GABRIEL MARTIN ALVAREZ; DANTE PAZ; MARÍA JOSEFINA BARRIOS EXPÓSITO; PABLO DANIEL CETICA
Lugar:
Tucumán
Reunión:
Congreso; XVII Congreso Argentino de Medicina Reproductiva SAMeR 2016; 2016
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Medicina Reproductiva
Resumen:
Trabajos en modelos animales han demostrado menor tasa de ovulación en animales diabéticos respecto aquellos con glucemia normal y además se evidenciaron alteraciones en la esteroidogénesis ovárica, diminución de la capacidad de respuesta hormonal y aumento de la atresia folicular. La insulina y las gonadotrofinas se emplean como suplemento en medios de maduración in vitro de ovocitos, varios estudios han demostrado que mejoran la competencia de desarrollo embrionaria. Sin embargo, su función en la regulación del metabolismo del complejo ovocito-cumulus (COC) no ha sido evaluada completamente. El objetivo de este trabajo fue estudiar la participación de la insulina y las gonadotrofinas en la incorporación de glucosa en el COC porcino durante la maduración in vitro. Se desarrolló un estudio experimental con diseño completamente aleatorizado. Los COCs se maduraron 44 hs en medio 199 y 5% de CO2 (control) bajo tres tratamientos: insulina, gonadotrofinas (LH y FSH) y gonadotrofinas + insulina. La fecundación se realizó en medio mTBM durante 18 hs con semen fresco de verraco. Se evaluó el porcentaje de maduración (mediante la coloración de Hoechst 33342), el consumo de glucosa (mediante espectrofotometría), la incorporación de un análogo de glucosa fluorescente (6-NBDG) (mediante espectrofotómetro de fluorescencia) y la presencia de GLUT 4 en COCs inmaduros y madurados (mediante inmonocitoquímica). Los valores de consumo e incorporación de Glucosa fueron analizados mediante ANOVA de una vía y Test de Tuckey, y los porcentajes de maduración con la prueba de Chi cuadrado.El porcentaje de ovocitos nuclearmente maduros aumentó en presencia de gonadotrofinas y gonadotrofinas con insulina (67 ± 4% para ambos tratamientos; p< 0,0001). Mientras que la insulina sola no tuvo efecto sobre la maduración nuclear respecto al control (56 ± 4% y 49 ± 4%, respectivamente). Sin embargo, se observó un aumento significativo en el porcentaje de ovocitos citoplasmáticamente maduros (capacidad de formar pronúcleos) bajo influencia de insulina, de gonadotrofinas y de la combinación de ambas (90 ± 4%, 89 ± 4% y 93 ± 3% respectivamente; control = 64 ± 6%; p < 0,0001). Las gonadotrofinas aumentaron el consumo de glucosa, sin embargo la insulina no tuvo diferencia respecto al control (1,2x10-5 ± 0,1x10-5mM/COC, 0,3x10-5 ± 0,1x10-5 mM/COC, 0,4x10-5 ± 0,1x10-5 mM/COC, respectivamente; p< 0,0001). No se halló diferencia significativa en la incorporación de glucosa fluorescente en ninguna de las condiciones de maduración (p > 0,05). También se determinó la localización de GLUT 4 tanto en el ovocito como en el cumulus porcino, ambas hormonas incrementaron la presencia de dicho transportador en el COC durante la maduración.En conclusión, las gonadotrofinas y la insulina mostraron efectos diferentes durante la maduración, las primeras aumentan las tasas de maduración y el consumo de glucosa, pero no regularían la velocidad de incorporación del azúcar. Mientras que la insulina ejerce efecto sobre la maduración citoplasmática actuando probablemente, como un factor trófico sin incidencia sobre el consumo ni la velocidad de incorporación de glucosa. Si bien la presencia del GLUT 4 aumentó por efecto de ambas hormonas, posiblemente este efecto adquiera relevancia hacia estadios postcigóticos.