Participación de la enzima lactato deshidrogenasa en la capacitación de espermatozoides porcinos criopreservados

PARIS DUPRAT ML; BREININGER E; RODRIGUEZ PC

Jornada; Quintas Jornadas de Jóvenes Investigadores en Ciencias Veterinarias; 2015

En la especie porcina existen relativamente pocos estudios que demuestren aun nivel bioquímico la relación existente entre la actividad enzimática y losprocesos que conducen a la adquisición de la capacidad fecundante. El objetivode este trabajo fue determinar la actividad de la enzima lactato deshidrogenasa(LDH; 1.1.1.27) y estudiar su participación en el proceso de capacitación enespermatozoides porcinos criopreservados. Esta enzima está involucrada en lageneración de la energía necesaria para los procesos metabólicos delespermatozoide y su actividad fue previamente determinada enespermatozoides porcinos frescos. La actividad de la enzima lactatodeshidrogenasa se determinó espectrofotométricamente a 340 nm durante 2minutos, a 37 °C. La unidad enzimática (UE) se definió como la cantidad deenzima lactato deshidrogenasa que cataliza la oxidación de 1 µmol deNADH/minuto. Los porcentajes de capacitación espermática se determinaron,en presencia y ausencia de diferentes concentraciones de oxamato de sodio(inhibidor competitivo de LDH; 0.5, 1 y 5 mM) en el medio de incubación, porla técnica de clorotetraciclina (CTC). También se evaluaron la vitalidad por latécnica de eosina/nigrosina y la movilidad por microscopía óptica en platinatermostatizada. Los resultados se expresaron como promedio ± desvío estándary fueron evaluados estadísticamente por análisis de varianzas (ANOVA) con eltest de Bonferroni como post-ANOVA. La actividad de LDH fue 0,92±0,67UE/1010 espermatozoides. El agregado del inhibidor competitivo de la enzimadisminuyó significativamente los niveles de capacitación a partir de 1 mM deoxamato de sodio. La movilidad disminuyó en forma dosis dependiente con elagregado de las diferentes concentraciones del inhibidor, que sólo afectó laviabilidad a una concentración de 5 mM. Los resultados obtenidos hasta elmomento indican que existe actividad de la enzima LDH en el espermatozoideporcino criopreservado y que esta enzima participa en la capacitaciónespermática, siendo indicativa de la importancia de la vía fermentativa en estacélula.