INPA   24560
UNIDAD EJECUTORA DE INVESTIGACIONES EN PRODUCCION ANIMAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Importancia de la enzima glucosa 6-fosfato deshidrogenasa como reguladora de la vía de las pentosas fosfato en COCs porcinos
Autor/es:
BREININGER E; VECCHI GALENDA B; ALVAREZ G; FERRETI E; GUTNISKY C; DALVIT G; CETICA PD
Reunión:
Jornada; IV Jornadas Internacionales del Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal; 2014
Institución organizadora:
INITRA, Facultad de Ciencias Veterinarias. UBA
Resumen:
Los resultados subóptimos de la maduración in vitro (MIV) de ovocitos porcinos se deben en parte al desconocimiento de los requerimientos metabólicos de los complejos ovocito-cumulus (COCs). El objetivo fue estudiar en COCs porcinos la actividad de la enzima clave de la vía de las pentosas fosfato (Glucosa 6-fosfato deshidrogenasa, G6PDH) y su participación en la MIV. Los COCs inmaduros y madurados in vitro se resuspendieron en agua destilada, sonicaron (4 min), centrifugaron (17000xg, 20 min, 4°C) y la actividad enzimática se determinó en los sobrenadantes por espectrofotometría. La unidad enzimática (U) se definió como la cantidad de enzima que cataliza la reducción de 1 μmol de NADP/minuto. La actividad enzimática se expresó en U/COC y en actividad específica (U/mg proteína) como media±SD y se comparó por el test de Student. Para evaluar la MIV, los COCs obtenidos por aspiración de folículos antrales (3-8mm) de ovarios provenientes de cerdas de faena fueron madurados durante 48 hs. a 39ºC, 5% CO2 en medio 199 suplementado con gonadotrofinas (control) y con distintas concentraciones de 6-aminonicotinamida (6-AN; 0,01 ? 0,1 mM), inhibidor farmacológico de la enzima G6PDH. La maduración nuclear se evaluó por presencia de la placa cromosómica en metafase II. La vitalidad de los COCs se evaluó por la coloración de diacetato de fluoresceína. Los porcentajes se compararon por la prueba de Chi-cuadrado. Las U de G6PDH fueron de (1,44±0,52) 10-5 y (1,54±0,51) 10-5 para COCs inmaduros y madurados in vitro, respectivamente (p