INVESTIGADORES
CESARI Andreina
congresos y reuniones científicas
Título:
Caracterización de proteínas secretorias de vesícula seminal de ratón con capacidad de inhibir actividades proteolíticas en fluido uterino y superficie espermática
Autor/es:
ALONSO, CAI; ZALAZAR, L; ASSIS, DM; JULIANO, L; DE CASTRO, R; CESARI, A
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVII Reunión de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2012
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigacion Clinica (SAIC)
Resumen:
Existen proteínas producidas en la vesícula seminal (VS) y secretadas al plasma seminal que regulan la fisiología espermática. Se ha descrito en Mus musculus una familia de proteínas secretorias, a la cual pertenece SVS7 (Seminal Vesicle Secretory protein 7): una pequeña proteína rica en cisteínas, cuya función en el sistema reproductor aun no está elucidada. En la misma especie, se demostró la presencia de SPINK3 (serine protease inhibitor Kazal type3), también en VS. Hemos reportado previamente que al unirse SPINK3 al espermatozoide evita la entrada de Ca+2 afectando la reacción acrosomal y la fosforilación de proteínas. Aun no se conoce la proteína target de este inhibidor ni en que fluido/tejido cumpliría esta función. Con el objetivo de caracterizar a SVS7 y SPINK3 en cuanto a su posible rol como inhibidores de proteasas en el tracto reproductor se obtuvieron los ADNc correspondientes a svs7 y spink3 y las respectivas proteínas recombinantes fueron producidas en E coli. Las proteínas rSVS7 y rSPINK3 (0.2 uM) fueron capaces de inhibir un 66% y 99% respectivamente la actividad de tripsina in vitro y de unirse a la superficie espermática. A fin de caracterizar estas actividades se determinaron sus parámetros cinéticos. Por otro lado, para investigar el rol fisiológico de la actividad inhibitoria de SVS7 y SPINK3, se evaluó su capacidad de inhibir la actividad proteolítica del fluido uterino, plasma seminal y proteínas de membrana del espermatozoide de ratón. Se observó que rSVS7-6H inhibe parcialmente la actividad proteolítica de tipo tripsina detectada en fluido uterino, mientras que rSPINK3-6H fue efectiva sobre la actividad tipo tripsina de la superficie espermática. Los resultados obtenidos sugieren que la presencia de inhibidores de serina proteasas en las secreciones de la vesícula seminal estaría relacionada con la regulación de proteasas presentes en el tracto reproductor de la hembra y en la superficie de los espermatozoides.