Regulación de la secreción de Interleuquina-1beta en células de epitelio respiratorio con Fibrosis Quística (deltaF508)

MARIÁNGELES CLAUZURE; CONSUELO MORI; MARÍA MACARENA MASSIP COPIZ; JUAN M. FIGUEROA; TOMÁS A. SANTA COLOMA; ANGEL GABRIEL VALDIVIESO; ANDREA V. DUGOUR

Congreso; IV Congreso Argentino de Fibrosis Quística; 2017

Introducción: la IL-1β es una citokina proinflamatoria producida en células inmunes y en el epitelio respiratorio. Estudios previos sugieren un papel de la IL-1β en la patogénesis del daño pulmonar en la FQ (IL-1β aumentada en BAL, asociación entre polimorfismos en el gen IL-1β y severidad de la FQ, y aumento de IL-1β en modelos experimentales de FQ). Existe controversia en cuanto a si este aumento se origina en inmunocitos o en el epitelio bronquial, y si es una respuesta a las infecciones recurrentes o crónicas o es propio de la FQ.Objetivos: estudiar la dinámica de la IL-1β y sus mecanismos de control en cultivos de células de epitelio respiratorio FQ (ΔF508). Material y Métodos: se cultivaron células de una línea de epitelio respiratorio FQ y células de la misma línea con el gen CFTR reestablecido por transfección. Ambos tipos celulares se trataron con IL-1β exógena, antiIL-1β, y antagonistas del receptor IL-1β. Las líneas celulares fueron tratadas igualmente con un inhibidor del CFTR. En un último tipo de experimento se expuso a las células a concentraciones crecientes de CL- luego de tratarlas con ionóforos para equilibrar el CL- extra e intracelular independientemente del CFTR. En cultivos basales y con todos los tratamientos se midieron la secreción de IL-1β al medio y las concentraciones intracelulares de su ARNm e IL-1β inmadura y madura. Se compararon los diferentes grupos de células y tratamientos. Para el análisis estadístico se utilizaron los tests de ANOVA y Tukey (significación p< 0.05). Resultados: las células FQ liberan un 40 % más de IL-1β que las células control. La inhibición del CFTR en las células control se asocia con un aumento en la expresión de IL-1β. La concentración de Cl- intracelular es mayor en las células ΔF508 y aumenta también en las células control al inhibir el CFTR. El aumento del Cl- intracelular por ionóforos aumenta la expresión de ARNm IL-1β, de IL-1β inmadura y madura intracelulares, y la secreción de la citoquina. Los tratamientos con anticuerpo bloqueante de IL-1β y el antagonista del receptor IL-1 inhibieron los cambios inducidos por las variaciones del Cl-.Conclusiones: La disfunción del CFTR origina un aumento del Cl- intracelular que promueve la maduración, y liberación de IL-1β. La acción de esta IL-1β sobre los receptores IL-1β de las propias células (acción autócrina) aumenta la síntesis de ARNm de IL-1β generando de esta manera un mecanismo de loop proinflamatorio.