ROL DEL ANIÓN CLORURO COMO SEGUNDO MENSAJERO EN LA MODULACIÓN DE LA EXPRESIÓN DE GENES ESPECÍFICOS.

VALDIVIESO, A.G.; CLAUZURE, M.; MASSIP COPIZ, M.M.; CANCIO, C.E.; MORI, C.; ASENSIO, C.J.A.; SANTA COLOMA, T.A .

Mar del Plata

Congreso; LX REUNIÓN DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN CLÍNICA (SAIC); 2015

SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN CLÍNICA (SAIC)

La Fibrosis Quística (FQ) es causada por mutaciones en el gen CFTRque codifica un canal de transporte de iones cloruro (Cl-) activado porAMPc. Numerosos genes-CFTR dependientes han sido identificados,aunque se desconoce el mecanismo de regulación involucrado.Debido a que el CFTR es un canal de Cl-, la alteración de su actividadconduciría a cambios en la concentración intracelular de Cl- ([Cl-]i).Nuestra hipótesis es que la [Cl-]i podría formar parte del mecanismode señalización en la modulación de genes específicos. Mediante latécnica de ?Differential display? se analizó el perfil de expresión encélulas IB3-1, línea celular de FQ, incubadas con una curva deconcentración de Cl- en presencia de dos ionóforos (tributyltin ynigericina), lo que permite equilibrar rápidamente la [Cl-]i con laconcentración de Cl- extracelular, independientemente de la funcióndel CFTR y de otros canales de Cl-. Mediante esta estrategia,observamos varios genes expresados diferencialmente. Dos de estosgenes expresados diferencialmente por la [Cl-]i fueron aislados,clonados y secuenciados. La modulación de la expresión de estosgenes por el anión Cl- fue validada por RT-PCR cuantitativa en tiemporeal. El primero de estos genes fue identificado como el gen RPS27que codifica la proteína ribosomal S27. El mismo mostró unaregulación negativa por el aumento de la [Cl-]i salvo a concentracionesno fisiológicas, por encima de 100 mM, para las cuales mostró unamodulación positiva (respuesta bifásica para la [Cl-]i). El segundo genidentificado, modulado positivamente por el aumento de la [Cl-]i,correspondió al gen GLRX5, que codifica la proteína glutarredoxina-5,de localización mitocondrial. Estos resultados sugieren que el aniónCl- actuaría como segundo mensajero, modulando la expresión degenes específicos en respuesta a cambios en la [Cl-]i.Agradecimientos: CONICET, PIP2012-2014-0685 y PICT2012-1278de la ANPCYT.