Modificaciones epigenéticas en Clonación porcina

BUEMO CARLA PAOLA

Posadas

Jornada; Jornadas Científico-Tecnológicas Universidad Nacional de Misiones; 2018

Universidad Nacional de Misiones

La técnica de clonación animal, consiste en transferir el núcleo de una célula somática donantedentro del citoplasma de un ovocito al que se le ha eliminado previamente su núcleo, con el objetivode obtener la maquinaria necesaria para generar un embrión. Es una técnica altamente ineficientepor ello se recurrió a la técnica de agregación embrionaria y al uso de drogas modificadorasde la epigenética embrionaria con el objetivo de obtener mayor número y calidad en embrionesporcinos clonados. Al principio del trabajo se utilizó embriones partenogénicos, en ellos se probaronfármacos que inducen modificaciones en la metilación y la acetilación de histonas, obteniéndoseuna combinación de drogas (5 Aza 1μM + PD0325901 1 μM) que demostró una tendenciaa aumentar el desarrollo embrionario in vitro. Posteriormente se prosiguió a realizar la agregaciónembrionaria, generandose dos grupos: el control (1x) y los agregados (3x). En los embriones agregadosaumentaron las tasas de desarrollo in vitro y el tamaño medido en diámetro embrionario.Cuando se pasó a trabajar en los clones porcinos, la agregación embrionaria produjo un aumentoen el diámetro y en el número de células embrionarias, mientras que el nivel de apoptosis fueestadísticamente más bajo en los embriones agregados 3x. Por otra parte, al mejorar desarrolloin vitro, número de células, el diámetro embrionario y disminuir los niveles de apoptosis se estabamejorando la reprogramación embrionaria, obteniéndose embriones de mejor calidad. Paraterminar, se combinó el método de agregación embrionaria y los fármacos inductores de modificacionesepigenéticas en el embrión temprano. El grupo 3x tratado con las drogas presentó unaumento en el tamaño embrionario, sin implicar cambios en el número celular. También presentóun incremento en la expresión génica en genes claves para el desarrollo de trofoblasto, implicadosen la placentación embrionaria, al igual que en genes antiapoptóticos y genes implicados en la víaMapk. Otro de los cambios visualizados fue la redistribución de las histonas y en la metilación delADN. Como conclusión, éste trabajo generó un aporte al estudio de la reprogramación embrionariaque deben sufrir los embriones provenientes de clonación, abarcando distintas variables queafectan el proceso de reprogramación, no obstante, queda mucho más por profundizar para podermaximizar la eficiencia de la técnica de clonación animal.