VALIDACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN DE UN GEN ASOCIADO A LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE YERBA MATE (Ilex paraguariensis)

FAY, J.; TALAVERA STEFANI, L.; PERCUOCCO, C.; ROJAS, C.; ARGÜELLES, C.; MIRETTI, M.

Posadas

Jornada; IX Jornadas Científico Tecnológicas  de la FCEQyN, Universidad Nacional de Misiones, Argentina; 2015

SeCyT, FCEQyN, UNaM

La fenilalanina amonio-liasa (PAL: Phenylalanineammonia-lyase) es una enzimacodificada por una familia multigénica en la mayoría de las especies estudiadas, enArabidopsisthaliana fueron mapeados cuatro genes PAL1 - PAL4. Esta enzima cataliza laprimera etapa en la ruta de fenilpropanoides y esta asociada a la actividad antioxidanteobservada en Yerba Mate con reconocido impacto en salud humana. PAL es inducible yresponde a estrés biótico y abiótico(agentes patógenos, irradiación, temperatura,humedad),. Para conocer la actividad funcional de esta enzima es necesario cuantificar laexpresión génica y validarla experimentalmente. En un estudio previo hemos identificado unfragmento de un gen PAL en Ilex paraguariensis (YM). El objetivo de este trabajo fueampliar el tamaño de estefragmento y validar la expresión del gen PAL en YM. Para ello seobtuvo ARN de plántulas de YM que fue utilizado como molde para amplificación concebadores específicos mediante PCR y RT-PCR. Los productos de PCR y de RT-PCR fueronvisualizados en geles de agarosa, purificados y su secuencia de ADN obtenida mediantesecuenciación capilar. La secuencia del fragmento adicional identificado en este trabajo hasido comparado con la información disponible en bases de datos. La retrotranscripciónpositiva valida la actividad del gen PAL en YM. Estos resultados demuestran la presencia deun gen PAL funcional en YM. Estos datos son relevantes para los análisis de actividad detranscripción diferencial del gen PAL en respuesta a ensayos que contrasten la incidencia defactores de estrés.