CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE AISLAMIENTOS DE Trichoderma harzianum

STOCCO, MARINA; CONSOLO, FABIANA; MONACO CECILIA; KRIPELZ, NATALIA; SALERNO GRACIELA; CORDO, CRISTINA

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Micología 2014 XXIII Jornadas Argentinas de Micología 1ra. Jornada de la Asociación Micológica Carlos Spegazzini; 2014

Fundación Miguel Lillo

Trichoderma harzianum es una especie cosmopolita. Se encuentra en un amplio rango de ambientes, como suelos agrícolas, praderas, bosques, salinas y en zonas de clima desérticos. Además, como habitante libre del suelo o endófito en las plantas. Se caracteriza por su rápido crecimiento, abundante producción de conidios y su resistencia a compuestos químicos nocivos. Estos hongos en general tienen requerimientos nutricionales mínimos y producen una alta variedad de metabolitos secundarios. De ahí la importancia de su masiva utilización en el control biológico. El objetivo de este trabajo fue determinar la variabilidad genética de 37 aislamientos de T. harzianum, con excelente capacidad biocontroladora sobre Septoria tritici, aislados de diferentes localidades de la Región triguera Argentina. Se utilizó la técnica molecular ISSR (Inter simple sequence repeat) con seisoligonucleótidos diferentes. El análisis de los datos se realizó mediante los programas Phoretix 1D, Excel 8.0, NTsys y Bootstrap. La longitud de fragmentos de todos los productos de amplificación variaron entre 200 pb hasta 3000 pb, con un promedio de 16 bandas polimórficas para cada marcador. Se obtuvo un total 132 bandas, de las cuales el 79,5% fueron polimórficas. El valor promedio de información polimórfica (PIC) fue de 0,32 indicando una variabilidad genética media. El análisis de agrupamiento permitió identificar 19 haplotipos de T. harzianum entre los 37 aislamientos analizados, lo cual significa que un 51% de los mismos presentaron un patrón único de bandas. Los aislamientos se agruparon en 3 grandes grupos, con una similitud del 50%. El grupo I incluyó 15 aislamientos, el grupo II 14 y el grupo III 8 aislamientos. El coeficiente de correlación cofenética calculado fue de 0.952 y los valores de bootstraping mayores al 90 %, indicando que el dendrograma es una buena representación de la relación genética entre los aislamientos. Los tres grupos de similitud compartieron aislamientos de diferente origen geográfico, obtenidos en diferentes años y con distinto nivel de antagonismos. Por otra parte, se observó que todos los aislamientos pertenecientes a la localidad de Lobería se agruparon en el cluster II y aquellos obtenidos de la localidad de Paraná se concentraron en el cluster I, lo que podría determinar una relación parcial por su origen. Para confirmar esta relación habría que ampliar el número de aislamientos de cada localidad, dado que para alguna de las zonas evaluadas solo se contaba con un representante. La variabilidad genética en T. harzianum estaría relacionada con su condición diploide y heterotálica. Las diferentes cepas tienden a recombinarse y evolucionar rápidamente en función de las frecuencias del tipo de apareamiento. Además, otros mecanismos, tales como mutaciones, la recombinación parasexual y la migración podrían explicar la diversidad genética observada en este estudio.