Análisis molecular de aislamientos de Fusarium spp. Asociados al marchitamiento vascular en tabaco en las provincias de Salta y Jujuy

BERRUEZO L; MERCADO CÁRDENAS G; SPEDALETTI Y; CHOCOBAR A; GALVÁN M; STENGLEIN S

Salta

Congreso; XLII Congreso Argentino Genética; 2013

Sociedad Argentina de Genética

El marchitamiento vascular producido por Fusarium spp. se manifestó en diversos lotes tabacaleros de las provincias de Salta y Jujuy, generando la necesidad del manejo de la enfermedad. La caracterización del fitopatógeno es uno de los pilares fundamentales para desarrollar nuevas estrategias de manejo. El objetivo del presente trabajo fue analizar la variabilidad genética en aislamientos de Fusarium spp. recolectados en distintas localidades de las provincias de Salta y Jujuy empleando la secuencia EF1alpha (elongation factor). Se realizó la extracción de ADN de micelio de 10 días de activo crecimiento de 9 aislamientos monospóricos del patógeno. A partir del ADN extraído se amplificaron la región EF1alpha mediante PCR utilizando los primers EF1 y EF2. Los fragmentos amplificados se separaron por electroforesis en geles de agarosa 1,5 % teñidos con GelRedTM y se purificaron para su posterior secuenciación. La identificación de las secuencias se obtuvo realizando una comparación con secuencias de la base de datos del NCBI (Centro Nacional de Información Biotecnológica) utilizando el algoritmo Blastn. El alineamiento de las secuencias y su comparación se realizó con ClustalW en el programa BioEdit. A partir del análisis de las secuencias se pudo identificar las variaciones presentes en las mismas y se generó un árbol de Neighbor-joining incluyendo secuencias control en el cual se agrupó a los aislamientos por especie revelando la existencia de variabilidad entre los aislamientos estudiados.