Aislamiento e identificación de bacterias con potencial efecto larvicida sobre mosquitos anofelinos (Diptera: Culicidae: Anophelinae) del noroeste argentino

GALANTE, GB; DIAZ NIETO, LM; ABRIL, M; ZAIDENBERG, M; BERÓN, CM; DANTUR JURI, J

Buenos Aires

Simposio; 4° Encuentro Internacional sobre Enfermedades Olvidadas y XVI Simposio sobre Control Epidemiológico de Enfermedades Transmitidas por Vectores; 2013

Fundación Mundo Sano

Introducción: En Argentina el principal vector involucrado en la transmisión de la malaria es Anopheles pseudopunctipennis. Las formas inmaduras crían en cuerpos de agua más o menos oxigenada. Una alternativa al control químico de estos insectos es el uso de bacterias como Bacillus thuringiensis subespecie israelensis (Bti) y Bacillus sphaericus (Bs). El objetivo del presente trabajo fue aislar y caracterizar cepas nativas de bacterias del género Bacillus a partir de larvas de anofelinos, a partir de muestras de agua y de suelos de sus criaderos. Además, se espera determinar la acción tóxica de estas cepas y así evaluar su potencialidad como agentes de control biológico de este vector. Materiales y métodos: La recolección de larvas, de muestras de agua y de suelo, fue realizada en las provincias de Jujuy y Salta de octubre a diciembre de 2012. Las larvas muertas durante el proceso de cría fueron aisladas, identificadas y conservadas hasta su análisis posterior. Las bacterias entomopatógenas esporuladas fueron aisladas y posteriormente identificadas morfoló¬gicamente. La caracterización toxicológica de las cepas potencialmente activas contra anofelinos se realizó a partir de cultivos de las bacterias aisladas con larvas de campo. Para la determinación de bacterias no cultiva¬bles presentes en larvas de anofelinos se amplificaron fragmentos del gen ribosomal 16S rRNA por medio de la Reacción en Cadena de la Polimerasa y el posterior análisis de las secuencias obtenidas. Resultados: Se analizaron un total de 269 larvas muertas, identificándose 155 como Anopheles pseudopunctipennis y 114 como Anopheles argyritarsis. Como resultado del cultivo, aislamiento e identificación morfológica, fueron obtenidos bacilos presentes en las larvas, en las muestras de agua y de suelo, a partir de lo cual se realizaron ensayos preliminares de toxicidad, observándose mortalidad larval en algunos de los ensayos realizados. Por otro lado, hasta el momento se han obtenido fragmentos del gen 16S rRNA a partir de 23 pooles de larvas que fueron enviadas a secuenciar y serán posteriormente corregidas y analizadas mediante el alineamiento local de secuencias del tipo BLAST (?Basic Local Alignment Searching Tool? o herramienta de búsqueda de alineamiento local básica). Discusión: Los insecticidas orgánicos como el DDT y los organofosforados han causado serios problemas de contaminación ambiental al ser extremadamente estable en el ambiente y bio-acumulables en los se¬res vivos, por lo cual resulta necesaria la búsqueda de alternativas como el control biológico que mini¬micen dichos daños. Dado los resultados obtenidos en los ensayos preliminares de toxicidad se espera caracterizar cepas de bacterias nativas que puedan ser usadas en programas de control de vectores de importancia sanitaria y contribuir al conocimiento del efecto que ejercerían estas bacterias sobre Anopheles pseudopunctipennis.