COMBINACIÓN DE TAXONOMÍA MORFOLÓGICA Y MOLECULAR PARA LA IDENTIFICACIÓN DE SECUENCIAS AMBIENTALES DE HONGOS MICORRÍZICOS ARBUSCULARES DE LAGUNAS DE ALTURA

SCORZA, MARÍA VICTORIA; SILVANI, VANESA ANALÍA; COLOMBO, ROXANA; FERNÁNDEZ BIDONDO, LAURA; BENAVIDEZ, MATÍAS; RECCHI, MARINA; FRACCHIA, SEBASTIÁN; GODEAS, ALICIA MARGARITA

Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Micología; 2014

Asociación Argentina de Micología

Los hongos del Phylum Glomeromycota forman la asociación simbiótica mutualista ?Micorriza Arbuscular? (MA) con  la mayoría de las plantas, incluyendo aquellas que crecen en ambientes extremos. La simbiosis MA cumple un papel fundamental en el funcionamiento de los ecosistemas, dado que aportan nutrientes a las plantas e incrementan la tolerancia frente a diversos tipos de estrés. Hasta la fecha, se han descripto alrededor de 270 especies de hongos MA. La taxonomía de estos hongos se basa en caracteres morfológicos de las esporas y caracteres moleculares por amplificación del ADN ribosomal (ADNr). En los últimos años, se produjo un avance acelerado en las técnicas moleculares empleadas en estudios ecológicos, como la pirosecuenciación. Lo que ha conducido a un incremento en el número de ?secuencias ambientales? almacenadas en las bases de datos públicas. Muchas de esas secuencias están erróneamente identificadas por la falta de análisis taxonómicos, representan especies nuevas, y por lo tanto, carecen de secuencias, ó especies que ya han sido descriptas pero que no han sido secuenciadas. Para revertir esta problemática, es necesario generar secuencias basadas en especies de referencia bien descriptas, e integrar las secuencias ambientales para un correcto análisis ecológico. En un estudio previo, se analizó por pirosecuenciación la diversidad de hongos MA en un ambiente extremo de la Argentina, la Reserva Laguna Brava (La Rioja, Argentina). Este trabajo generó numerosas secuencias, las cuales muchas de ellas no pudieron resolverse a nivel especie. El objetivo de este trabajo fue identificar especies de hongos MA aislados de Laguna Brava combinando la taxonomía basada en caracteres morfológicos y moleculares. E integrar esa información con las secuencias ambientales obtenidas de la pirosecuenciación y secuencias de especies de referencia de las bases de datos públicas. Para ello, se cultivaron in vivo los hongos MA de Laguna Brava, a partir de los cuales se aislaron esporas para los análisis morfológicos, y amplificación del ADNr con primers específicos. Todas las secuencias se compararon con las bases de datos, y se analizaron por el método del vecino más cercano. Las secuencias ambientales de Laguna Brava sin resolver a nivel especie, que presentaban un 99% de similitud con especies filogenéticamente cercanas de Rhizophagus intraradices y R. irregularis,  sólo pudieron diferenciarse por los estudios morfológicos, y no por el análisis filogenético del ADNr. Otras secuencias ambientales reconocidas como Funneliformis sp. lograron identificarse como F. mosseae por ambos análisis. Basado en los caracteres morfológicos, se identificó Entrophospora infrequens. Sin embargo, la secuencia de dicha especie se asemejaba con un 97% a varias secuencias ambientales identificadas como ?uncultured Glomus?. Este trabajo refuerza la importancia de la taxonomía de los hongos MA y la necesidad de incorporar dicha información en futuros estudios ecológicos moleculares.