Distintas condiciones de crecimiento afectan la formacion de biopelícula de Staphylococcus aureus provenientes de mastitis bovina

CÁCERES ME; LOMBARTE SERRAT A; DOTTO C; SULIGOY M; DIAZ R; SORDELLI DO; GIACOMODONATO M; BUZZOLA F

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología; 2019

INTRODUCCIÓN: La mastitis es la enfermedad más importante de los rebaños lecheros siendo {S. aureus} uno de sus principales agentes. La formación de biopelícula es clave para la subsistencia de este patógeno en la glándula mamaria ya que lo protege de la acción del sistema inmune y de los antibióticos. La infección con {S. aureus} altera la composición normal de la secreción mamaria viéndose modificados los niveles de sus componentes y pH. Previamente demostramos que la limitación parcial de hierro favorece la formación de biopelículas en {S. aureus} de manera PIA (polisacárido intercelular de adherencia) dependiente y promueve cambios en el metabolismo que disminuyen el pH. OBJETIVO: Comparar la capacidad de formar biopelículas de cepas de {S. aureus} aisladas de casos de mastitis subclínica de la región, en medios nutritivos y carentes de hierro, así como en fluidos propios de la industria lechera como leche y suero lácteo.M&M: Se utilizaron 16 cepas de {S. aureus}. Las biopelículas se formaron en caldo tripteína de soja suplementado con 0.25% glucosa (TSBg), TSBg depletado de iones hierro por tratamiento con Chelex-100 (CTSBg), leche entera (L) y suero lácteo de quesería (SLQ) estériles. La biomasa producida se cuantificó espectrofotométricamente luego de la tinción con cristal violeta. La expresión de PIA se determinó mediante ELISA y medición de la DO a 492 nm.RESULTADOS: La producción de PIA en las diferentes cepas varió entre 2.43 y 0.51. Luego de 24 h, el medio de cultivo de las biopelículas formadas en las distintas condiciones se acidificó respecto al valor de pH inicial. El 69 % de las cepas mostraron alta y moderada capacidad para formar biopelícula en TSBg. Sin embargo, en medio CTSBg, la biomasa de las biopelículas de las cepas clasificadas como altas formadoras disminuyó un 40%. El 71% de las cepas cuyas matrices extracelulares tienen predominio de PIA mostraron ser capaces de formar biopelícula en CTSBg sugiriendo que la producción de PIA en ausencia de iones Fe libre no estaría impedida. Un único aislamiento fue incapaz de formar biopelícula en L y SLQ. En el 88% de las cepas se observaron valores de biomasa indetectables cuando las bacterias se crecieron en SLQ. La formación de biopelícula en L se observó aumentada en comparación al resto de las condiciones (p