Estudio de variantes formadoras de biopelicula en Staphylococcus aureus aislados de mastitis bovina.

LOMBARTE-SERRAT A, DOTTO C, CALVINHO L, SORDELLI D, GIACOMODONATO M, BUZZOLA F.

Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Microbiologia (CAM 2013).; 2013

AAM

Staphylococcus aureus es la bacteria pat¨®gena que m¨¢s frecuentemente infecta la gl¨¢ndula mamaria bovina ocasionando mastitis cl¨ªnica o subcl¨ªnica. Las infecciones recurrentes de la gl¨¢ndula mamaria bovina se atribuyen principalmente a la capacidad de producci¨®n de biopel¨ªcula de los pat¨®genos causantes de mastitis, entre los cuales, S. aureus tiene un papel preponderante. El objetivo del presente trabajo fue identificar y caracterizar variantes negativas de biopel¨ªculas de S. aureus aislados de leche de bovinos con mastitis. Se estudiaron 97 aislamientos epidemiol¨®gicamente no relacionados seg¨²n los perfiles de macrorrestricci¨®n con SmaI y posterior electroforesis en campos pulsados. La biomasa de las biopel¨ªculas se cuantific¨® espectrofotom¨¦tricamente. Se estableci¨® que el 29% (28/97) de los aislamientos no producen biopel¨ªcula. De entre los restantes, el 33% (23/69) result¨® ser alto productor de biopel¨ªcula. Adem¨¢s, se evalu¨® la morfolog¨ªa y color de las colonias crecidas en agar rojo Congo (CRA) a fin de determinar la producci¨®n de slime. La concordancia entre ambas metodolog¨ªas fue de 0,507 (coeficiente de Rand). A partir de una ¨²nica colonia negra y rugosa en placas de CRA de 5 aislamientos seleccionados, se obtuvieron variantes negativas de biopel¨ªcula. La incidencia de las variantes oscil¨® entre 1,12x10-10 ¨C 1,08x10-7. La actividad hemol¨ªtica, producci¨®n de proteasas extracelulares, nucleasa, estafiloxantina y biopel¨ªcula de las diversas variantes se compararon con aquellas observadas para cada aislamiento parental. Se hallaron diferencias en la producci¨®n del pigmento y tipo de hemolisina. Un ¨²nico aislamiento porta la isla de patogenicidad SaPIbov2 (bap+). No se observ¨® la inserci¨®n de la IS256 en el locus icaADBC presente en todos los aislamientos.  Tampoco se hall¨® la IS256 insertada en el gen regulatorio sigB. Se destaca que un 10% de los aislamientos formadores de biopel¨ªcula no posee el gen sigB lo que ocasiona la p¨¦rdida de expresi¨®n de estafiloxantina y prote¨®lisis aumentada. El 83% de los aislamientos expres¨® ¦Ä-hemolisina demostrando que el sistema agr estar¨ªa funcional. El conjunto de observaciones sugiere que la poblaci¨®n bacteriana se diversificar¨ªa promoviendo la emergencia de variantes formadoras de biopel¨ªcula. Esta particularidad le permitir¨ªa a S. aureus persistir en la gl¨¢ndula mamaria bovina por tiempos prolongados.