AVANCES EN EL DESARROLLO DE UNA VACUNA CONTRA LA ENCEFALITIS EQUINA VENEZOLANA MEDIANTE BIOINGENIERÍA DE PARTÍCULAS ?TIPO VIRUS? Y PROTEÍNAS SUPERFICIALES DE GIARDIA LAMBLIA

OMS SERGIO; FASSOLA LUCIANA; RUPIL LUCÍA LARA; ALBRIEU GUILLERMO; SERRADELL MARIANELA C

Congreso; XIII CONGRESO ARGENTINO DE VIROLOGÍA; 2021

El virus de la encefalitis equina Venezolana (VEEV) es un arbovirus zoonótico de gran impacto sanitario y económico, capaz de causar cuadros febriles y neurológicos en equinos y humanos. La única vacuna aprobada para equinos en países con circulación endémica es la TC-83 y consiste en partículas infectivas atenuadas obtenidas a partir de una cepa epizoótica. Entre sus desventajas se destacan la posible reversión al fenotipo virulento y la propagación en la naturaleza. En nuestro instituto se desarrolló una estrategia de vacunación basada en partículas similares a virus (virus-like particles, VLPs) decoradas con proteínas de superficie de Giardia lamblia (Variant-specific Surface Proteins, VSPs). Esta plataforma combina la inmunogenicidad de las VLPs con las propiedades adyuvantes y protectivas de las VSPs. Como objetivo nos propusimos obtener una vacuna segura y efectiva montando los antígenos inmunodominantes del VEEV en este sistema y demostrar así su adaptabilidad con diferentes modelos virales. En primer lugar, amplificamos los genes que codifican las glicoproteínas de interés de la cepa vacunal TC-83 y luego los clonamos en vectores de expresión para células eucariotas. Con los plásmidos obtenidos transfectamos diferentes líneas celulares y verificamos su expresión mediante inmunofluorescencia y Western blotting. A su vez, para la inmunodetección generamos suero policlonal de ratones infectados con la cepa vacunal. Además, produjimos de manera recombinante la proteína E2 con un tag de histidina, para generar anticuerpos exclusivos contra este epítopo. Para la producción de VLP-VSPs co-transfectamos una línea celular que expresa establemente en su membrana la VSP, con dos plásmidos: uno queexpresa el antígeno viral y el otro, la proteína Gag del virus de leucemia murina que permite el ensamblado de las VLPs. Actualmente estamos caracterizándolas y luego evaluaremos su efectividad como inmunógeno en modelo murino y su utilidad para el diagnóstico serológico.