DESARROLLO DE MÉTODOS DIAGNÓSTICOS PARA ENTEROPARÁSITOS

SERGIO R OMS; MARIANELA DEL CARMEN SERRADELL; ALICIA SAURA; HUGO DANIEL LUJÁN

Santiago

Congreso; XXIV Congreso Latinoamericano de Parasitología-FLAP; 2017

Sociedad Chilena de Parasitología (SOCHIPA)

Debido a su gran relevancia en países menos desarrollados, la Organización Mundial de la Salud ha incluido dentro del grupo de Neglected Diseases Initiative a la Giardiosis, la Amebiosis y la Cryptosporidiosis. Los métodos diagnósticos utilizados actualmente para estos parásitos patógenos tienen baja eficiencia, son laboriosos, algunos de ellos son costosos, requieren de sofisticado equipamiento y de personal muy bien entrenado. En nuestro laboratorio hemos desarrollado anticuerpos monoclonales (mAbs) capaces de detectar moléculas de la pared quística de Giardia lamblia y Entamoeba histolytica/dispar y antígenos de ooquistes de Cryptosporidium sp., sin presentar reacción cruzada con ningún otro microorganismo intestinal. Estos anticuerpos fueron testeados usando quistes y ooquistes genotipificados por inmunofluorescencia, enzimo-inmuno ensayos, dot y western blotting. Los ensayos mostraron alta especificidad y sensibilidad cuando se analizaron cientos de muestras de materia fecal de pacientes infectados provenientes de varias regiones del mundo. Por otra parte se desarrollaron anticuerpos monoclonales específicos contra proteínas de superficie del trofozoíto de E. histolytica/dispar los cuales fueron utilizados para evidenciar la presencia del parásito en cortes histológicos de muestras sospechadas de amebomas mediante técnicas de inmunohistoquímica. Utilizando los anticuerpos específicos para quistes y ooquistes de Giardia, Entamoeba y Cryptosporidium desarrollamos un kit diagnóstico fácil de usar y de bajo costo en formato de tira reactiva. Los anticuerpos seleccionados se colocaron en una membrana de soporte para lograr la captura de los antígenos de los parásitos provenientes de muestras de materia fecal resuspendidas en agua, la presencia de estos microorganismos se pone en evidencia con el agregado de un segundo mAb marcado con peroxidasa o con partículas de oro. Este nuevo método permite una rápida visualización de la presencia de estos parásitos directamente de las muestras de materia fecal con una alta especificidad y sin el uso de ningún equipamiento adicional en poco tiempo, pudiendo detectar además pequeñas cantidades de quistes y ooquistes de las muestras resuspendidas. Este kit diagnóstico en formato de tira reactiva permite analizar un alto número de muestras en paralelo, no requiere personal entrenado ni equipamiento sofisticado, haciendo de del mismo una herramienta valiosa para la detección de estos parásitos en zonas rurales y/o áreas pobres del mundo, así como para viajeros que se desplazan a zonas endémicas donde estos parásitos causales de diarrea son comunes.