El condicionamiento a la diferenciación de cultivos primarios de pulpa dental humana induce su capacidad mineralizante

ACQUIER, A.; MERHAR, V.A.; PAZ, C.; DE COUTO PITA, A.K.; MENDEZ, C.F.

San Nicolás

Congreso; L Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Odontológica; 2017

Sociedad Argentina de Investigación Odontológica

Reportamospreviamente el establecimiento de cultivos primarios de células de pulpa dental(PD) humana cuya morfología cambia en presencia de factores de diferenciaciónosteoblástica, en un proceso en el que participa la quinasa de señalesextracelulares 1/2 (ERK). Objetivo: el objetivodel presente trabajo ha sido investigar si la adición de factorescondicionantes de diferenciación cambia la tasa de proliferación celular, y determinarla capacidad mineralizante de los cultivos. Materiales y métodos:se establecieron cultivos por explante de células a partir de pulpa disgregadamecánicamente luego de su remoción de molares retenidos extraídos de donantesadultos por fallas de erupción. El tejido se incubó a 37°C y 5% CO2 enmedio de Dulbecco modificado por Eagle con 10% de suero fetal bovino (SFB) yL-glutamina (DMEM) o en DMEM conteniendo 300 mM ácido ascórbico, 10mM b-glicerofosfato,15% SFB y 100 uMdexametasona como factores de diferenciación (DMEM-OD). La proliferacióncelular se analizó colorimétricamente luego de la tinción con violeta decristal y la actividad mineralizante por medio de la tinción de los cultivoscon rojo de alizarina. Resultados:en cultivo, las células proliferaron en medio DMEM hasta el día 7 con un tiempode duplicación de 24 hs, mientras que la incubación en medio DMEM-OD resultó enuna reducción significativa de la proliferación (p<0,01 por ANOVA de doblevía, n=3) a todos los tiempos ensayados. La adición de dexametasona al medioDMEM redujo significativamente (p<0,01) la proliferación (0,13±0,01 vs.0,38±0,01 UA para DMEM + dexametasona y DMEM, respectivamente) mientras que losdemás factores no tuvieron efecto. DMEM-OD incrementó significativamente(p<0,01) la actividad mineralizante en forma dependiente del tiempo (0,125±0,003 vs 0,138±0,002 y 0,096±0,001 vs 0,272±0,002 UA para DMEM yDMEM-OD a 7y 28 días, respectivamente). Conclusión:nuestros resultados demuestran que la adición de factores de diferenciación almedio de cultivo detiene la capacidad de proliferación celular y promueve la actividadmineralizante, sugiriendo la participación de ERK1/2 en el inicio del procesode diferenciación odontoblástico.