MÉTODO DIRECTO PARA EL ANÁLISIS DE LOS PATRONES DE RECOMBINACIÓN EN AVES.

LUCÍA DEL PRIORE

CABA

Jornada; V Jornadas de Jóvenes Investigadores; 2015

FundaVet

Existen dos enfoques para analizar los patrones de recombinación meiótica y por ende para construir los mapas de recombinación genómicos: una estimación de la recombinación directa, y un método genético indirecto que aprovecha los polimorfismos en el ADN. El método directo o citológico utiliza la localización de la proteína MLH1 sobre los complejos sinaptonémicos (CS) en paquitene. Se ha demostrado que la localización de MLH1 reproduce de manera precisa la distribución del crossing over en células meióticas en paquitene en mamíferos y en aves. El objetivo fue describir el método directo utilizando como ejemplo a la codorniz (Coturnix japonica). Microextendidos de CS a partir de ovocitos y espermatocitos de codornices. Inmunodetección del CS, de los centrómeros y de MLH1. Recuento y análisis de focos de MLH1 en 300 núcleos en paquitene de ambos sexos. Comparar la longitud genética obtenida por este método con la longitud obtenida por el método indirecto. A partir de la inmunodetección de la proteína MLH1 sobre los CS pudimos construir el mapa de recombinación promedio entre machos y hembras de la codorniz. La longitud genética obtenida a partir de este estudio (2580 cM) es considerablemente mayor que las estimaciones a partir de estudios de ligamiento. El mapa de ligamiento más completo tiene una longitud de 1904 cM. El método directo tiene ciertas ventajas sobre el método indirecto. Entre ellas podemos mencionar que provee una visión de los patrones de recombinación genética en células individuales, permitiendo una estimación directa de las distancias genéticas y de la frecuencia de recombinación a partir del mismo set de datos.