La activacion de la fosfolipasa A2 por dopamina involucra la generacion de ROS y la activacion de ERK1/2 en celulas de tubulo proximal renal

ACQUIER, A.; MORI SEQUEIROS GARCIA, M.; GOROSTIZAGA, A.; MARCHIONE, V.; GOMEZ, N.; PAZ, C.; MENDEZ, C.F.

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2012

Sociedad Argentina de Investigación Clíni

Reportamos previamente la participación de la proteína kinasa C (PKC) y de las especies reactivas del oxígeno (ROS) en la activación de la kinasa de señales extracelulares 1 y 2 (ERK1/2) y del factor nuclear kB (NF-kB) en la vía de transducción de señales de la dopamina (DA) en células de túbulo proximal renal. Dado que en diversos sistemas la actividad de la enzima fosfolipasa A2 (FLA2) es regulada por fosforilación por ERK1/2, nuestro objetivo fue investigar el rol de esta kinasa en la regulación de la actividad de FLA2 por la DA. Se utilizaron células de la línea OK (opossum kidney) y se estudió la expresión de las isoformas de la familia IV de la FLA2 por RT-PCR semicuantitativa, la localización subcelular de FLA2 IV A por microscopía de fluorescencia, la actividad de la enzima por fluorometría y la liberación de ácido araquidónico (AA) por cromatografía en capa delgada (TLC). El análisis por PCR demostró que las células OK expresan en forma mayoritaria la isoforma IV A de la FLA2 en favor de la forma IV B, no registrándose expresión de la isoenzima IV C. DA (10-6M) promovió la activación de FLA2 en forma dependiente del tiempo, con un máximo a los 15 min de estimulación (control: 2,58±0,04; DA: 3,46±0,10 U/mg, p