ANÁLISIS PREDICTIVO DEL EFECTO FISIOPATOGÉNICO DE VARIANTES DE SIGNIFCADO INCIERTO: EJEMPLO DE MUTACIONES PEQUEÑAS EN MARCO PRESENTES EN PACIENTES CON DMD/DMB

SZIJAN IRENE; BRUQUE, CARLOS DAVID; MAZZANTI, CHIARA; LUCE LEONELA; GILIBERTO FLORENCIA; CARCIONE, MICAELA

Congreso; 17º Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas de Buenos Aires; 2018

Hospital de Clínicas José de San Martín

Análisis predictivo del efecto fisiopatogénico de variantes de signifcadoincierto: Ejemplo de mutaciones pequeñas en marco presentes enpacientes con DMD/DMBObjetivo: La Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) y la Distrofia Muscular deBecker (DMB) son enfermedades recesivas ligadas al cromosoma X ygeneradas por alteraciones moleculares en el gen DMD. DMD consiste en unadistrofia severa, causada por la ausencia de la proteína Distrofina. En cambio,DMB es menos frecuente y menos severa, originada por alteracionescuanti/cualitativas de la Distrofina. Las mutaciones descriptas en el gen DMDincluyen grandes deleciones/duplicaciones en el 80% de los casos ymutaciones pequeñas/puntuales en el 20% restante. La ?Teoría del Marco deLectura? establece una correlación entre la mutación y el fenotipo del paciente,la cual se cumple en 92% de los casos. De acuerdo a esta teoría, mutacionesque generan corrimiento del marco de lectura se asocian a DMD, mientras queaquellas que lo mantienen conllevan a un fenotipo leve (DMB). Puesto que lapesquisa de mutaciones puntuales se realiza mediante metodologías desecuenciación masiva en paralelo (NGS), con mayor frecuencia se obtienenvariantes de significado incierto (VUS) que deben ser validadas. El objetivo delpresente trabajo es brindar herramientas para su análisis.Materiales y Métodos: Se analizó por la técnica de MLPA una cohorte de 175pacientes con diagnóstico clínico de DMD/DMB, 40 de ellos también estudiadospor Secuenciación de Exoma Completo. También, se empleó secuenciación deSanger, análisis informático predictivo del efecto de las variantes y modeladomolecular.Resultados: Entre la población estudiada se destacan 2 pacientes con cuadrosde DMD, portadores de mutaciones pequeñas en marco(c.10101_10103delAGA y c.120_131delCTTCAGTGACCT). Dada ladiscrepancia con el fenotipo esperado por la ?Teoría del Marco? y la ausencia oescasos reportes previos de pacientes con estas mismas alteracionesmoleculares, se emplearon 2 estrategias con el fin de aumentar la certeza delpredicho efecto patogénico. Por una lado, un estudio de segregaciónintrafamiliar de la mutación y, por el otro, un modelado de la mutación de modode establecer su consecuencia en la estructura y funcionalidad de la proteína.Conclusiones: El presente trabajo comparte distintas estrategias para lavalidación del efecto patogénico de variantes de significado incierto, uno de los mayores desafíos en la interpretación de los datos de la secuenciación masiva en paralelo.