PESQUISA DE MUTACIONES PEQUEÑAS EN EL GEN DMD MEDIANTE SECUENCIACIÓN DE EXOMA COMPLETE: DIAGNÓSTICO Y CARACTERIZACIÓN DEL GEN

SZIJAN IRENE; LUCE LEONELA; MAZZANTI, CHIARA; GILIBERTO FLORENCIA; CARCIONE, MICAELA

Congreso; 17º Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas de Buenos Aires; 2018

Objetivo: Las Distrofinopatìas son enfermedades neuromusculares de herencia recesiva ligada al cromosoma X y generadas por mutaciones en el gen DMD. El espectro de alteraciones moleculares en este gen incluye grandes deleciones/duplicaciones en el 80% de los casos, identificadas por MLPA, y mutaciones puntuales en los restantes 20%. Hasta el momento no existe tratamiento efectivo para estas patologías, por ello resulta importante brindar asesoramiento genético a las familias afectadas, identificar mujeres portadoras y prevenir el nacimiento de nuevos afectados. No obstante, ha comenzado a implementarse la terapia mutación específica: Premature Stop Codon Readthrough. El objetivo del presente estudio es identificar mutaciones pequeñas en el gen DMD mediante secuenciación de exoma completo (WES), de modo de confirmar el diagnóstico clínico, identificar candidatos para el tratamiento Readthrough y detectar mujeres portadoras de la patología. Por otro lado, nos propusimos caracterizar las variantes de secuencia en el gen DMD e identificar haplotipos cosegregantes.Materiales y Métodos: Hemos analizado 40 individuos no emparentados (38 varones afectados y 2 mujeres con riesgo de ser portadoras) con resultados negativos de MLPA. Para el análisis del efecto patogénico se implementaron: bases de datos de individuos normales, bases de datos de pacientes con Distrofinopatía y distintos software predictores. Además, se empleó Haploview para el estudio de haplotipos cosegregantes.Resultados: El WES y el algoritmo de selección de variantes patogénicas demostró ser eficiente, presentando una tasa de detección del 84% (32/38). Pudimos determinar 15 candidatos para la terapia Readthrough y excluir a las 2 mujeres de ser portadoras. En cuanto a la caracterización de la ocurrencia y diversidad de las variantes de secuencia pertenecientes a nuestra cohorte y a la base de datos LOVD, no identificó hotspots pero sí mostró exones/intrones poco probables de sufrir mutaciones puntuales. Además, hemos detectado la existencia de 2 bloques de haplotipos cosegregantes. Conclusiones: El presente trabajo constituye el primero en realizar la pesquisa de mutaciones pequeñas para el gen DMD mediante WES en la poblaciòn argentina, contribuyendo con la caracterización de nuestra población y el conocimiento básico de la ocurrencia de mutaciones puntuales.