“LAS ALTERACIONES INMUNOLÓGICAS DE LAS CÉLULAS MIELOIDES SON COMUNES A LA ESTEATOSIS SIMPLE (ES) Y

INZAUGARAT ME; E. GONZALEZ BALLERGA; WALD M; VODÁNOVICH F; BAZ PLACIDA; DARUICH, JORGE; A. C. CHERÑAVSKY

Buenos Aires

Congreso; XVII congreso Argentino de Hepatología; 2013

Asociación Argentina para el estudio de las enfermedades del´hígado

Las enfermedades del hígado graso no alcohólico (EHGNA) se caracterizan por la presencia de alteraciones metabólicas que inducen esteatosis simple (ES), y progresión  de su severidad en parte mediadas por desbalance inmunológico pro-inflamatorio que conduce a esteatohepatitis (EHNA). Hipótesis: Las alteraciones pro-oxidativas y proinflamatorias en monocitos (Mo), linfocitos T (LT) y/o células de Kupffer (CK) se acentúan con la severidad de las EHGNA, y podrían modularse con curcumina (CUR). Objetivos: evaluar la distribución y diferenciación frente a leptina (Lep) de LT CD4/CD8; el estallido respiratorio frente a ácido linoleico (AL), palmítico (AP), Lep y TNFa y la inducción de TNFa por Lep en Mo, la sensibilidad a CUR y su validación mediante el desarrollo de un modelo murino de EHNA. Pacientes y métodos: 70 adultos EHGNA (54±8.5), 50 controles (Co, 52±7.6); ratones C57BL/6 dieta normal (DN) o de alta energía (AE), 23 semanas con/sin CUR. Producción de especies reactivas de oxígeno (ERO): se preincubaron células mononucleares de sangre periférica (CMSP) y suspensiones celulares hepáticas con diclorofluoresceína 5µM y AL 200µM, AP 400µM, Lep10nM, TNFa 1.2 ng/ml +PMA100ng/ml, con/sin CUR 30µM (50 min). Producción de TNFa: se incubaron CMSP con Lep 100nM+Brefeldina 1µM con/sin CUR 5µM (6 h). Producción de IFN-g: se incubaron CMSP con/sin Lep 10nM (19 h) ± PMA 100ng/ml Se identificaron Mo (CD14+CD16+), CK humanas (CD11b+CD14+),CK murinas (F4/80+) y LT(CD4+/CD8+) por citometría de flujo. Índice de estimulación de ERO en Mo (IEERO: fluorescencia DCF estimulado/basal, índice de incremento de TNFa en Mo (IITNFa: producción post- estimulación/basal). Estadística: ANOVA (dos factores) y post-test de Bonferroni, Mann-Withney, Wilcoxon (pareado), Spearman (correlación) y chi cuadrado (c2) (asociación). Resultados: AL aumentó el IEERO en Mo (p=0.032, EGHNA vs. Co), el cual revirtió con CUR (p= 0.030, vs. sin CUR), e incrementó el estallido respiratorio en CK (p=0.015). La alteración en ambos parámetros correlaciona positivamente en EHGNA (r=0.610, p=0.032), sin asociación con su severidad. Los porcentajes de LTCD4+IFNg+ y CD8+IFNg+ son mayores en EHGNA (p=0.007 y 0.008 respectivamente, vs. Co) con asociación a EHNA (χ2, p=0.029 y p=0.036). Lep indujo mayor  producción de IFN-g en LT CD4 y CD8 (p<0.05, vs. Co) y de TNFa en Mo (p=0.029, vs. Co) sin asociación con la severidad en EHGNA, que revirtieron con CUR (p=0.031, vs. sin CUR). Las CK de ratones AE aumentaron la producción de ERO frente a AL (p<0.05, vs. DN) y de TNFa frente a Lep (p<0.05 vs. DN); ambos efectos fueron prevenidos por tratamiento in vivo con CUR (p<0.05). Conclusiones: las alteraciones inmunológicas particularmente asociadas a células mieloides están presentes en todo el espectro de EHGNA, cuestionando la condición "benigna" de la ES. La sensibilidad a la CUR tanto in vitro como in vivo sugiere su potencial utilidad en estrategias terapéuticas de modulación de la inflamación.