Respuesta proinflamatoria de monocitos células de Kupffer en pacientes con enfermedades del hígado graso no alcohólico

INZAUGARAT, ME; M. BALLESTA ; A. BILLORDO; D. FONTANA ; R. F. DÍAZ ; M. LINARES; E. GONZALEZ BALLERGA ; J. DARUICH ; J.A. SORDA ; AC CHERÑAVSKY

Congreso; XXII Congreso de la Asociación Latinoamericana para el estudio del hígado; 2012

Asociación Latinoamericana para el estudio de las Enfermedades del higado

Objetivos: Las enfermedades del hígado graso no alcohólico (EGHNA) abarcan un amplio rango de desórdenes relacionados con la obesidad en individuos con dislipidemia e híperleptinemia. Las células de kupffer (CK) y  los monocitos (Mo) son fuente de especies reactivas del oxigeno (ERO) y citoquinas que juegan un papel central en el progreso de la inflamación y daño hepático. Nuestro objetivo consiste en evaluar los efectos de ácido linoleico (AL) y leptina (Lep) en Mo y CK sobre la producción de ERO y TNF-a así como estudiar el potencial efecto anti-inflamatorio y antioxidante de la Curcumina (Cur). Pacientes y Métodos: Se obtuvieron células mononucleares de sangre periférica (CMSP) y biopsias hepáticas de pacientes adultos con EHGNA (n=15) u otras hepatopatías no-EHGNA (n=7) así como de 30 controles de igual franja etaria (Co). Para evaluar la producción de ERO, CMSP y suspensiones de células hepáticas obtenidas mediante procedimientos químicos y mecánicos fueron incubadas con diclorofluoresceina-diacetato [5 µM], estimuladas con Lep [10nM] or AL [200µM] +/-Cur [30µM], marcadas con anticuerpos anti-CD14 y -CD11b y analizadas por citometría de flujo. Calculamos un Indice de Estimulacion (IE) como el cociente entre la Intensidad de Fluorescencia Media (IMF) en células estimuladas y la IMF basal. Evaluamos producción de TNF-a intracelular en CMSP estimuladas con Lep [CD14+ TNF-a+] y calculamos índices de incremento post- estímulo (II). Utilizamos los análisis estadístico de Kruskal-Wallis, Mann-Whitney con correción de Bonferroni (pc), test pareado de Wilcoxon (estadístico pp) y  la correlación de Spearman. Resultados: El AL indujo un aumento en la produccion de ERO en Mo de EGHNA (pc= 0.032 vs. Co) que disminuyó en presencia de Cur (pp= 0.030). El AL estimuló el estallido respiratorio en CK de pacientes EHGNA (pp=0.015) y no-EGHNA (pp=0.040). La producción de ERO inducida por AL en CK y Mo correlacionó positivamente en pacientes con EHGNA (r=0.610, p=0.032). La Lep  indujo un aumento en la producción de TNF-α en Mo de Co, EHGNA y no-EGHNA (pp= 0.031; 0.015 y 0.043 respectivamente) con un incremento en el II en EGHNA (pc=0.029 vs. Co). La producción de ERO y TNF-a por Mo correlacionaron positivamente en EGHNA (r= 0.684, p=0.034). Conclusión: las EHGNA involucran efectos proinflamatorios mediados por ácido linoeico y leptina tanto en células mieloides hepáticas como periféricas. El bloqueo de la respuesta proinflamatoria por Cur podría contribuir al tratamiento de las EHGNA.   Key words: non alcoholic steatohepatitis - pro inflammatory mediators - myeloid cells