La metilación del ADN por la enzima ADN adenina metiltransferasa participa en la regulación del mecanismo de recombinación de la integrasa de clase 1 en Salmonella enterica.

QUIROGA MP; CENTRÓN D; GALÁN A; SARNACKI SH; GAMBINO AS; CERQUETTI MC

Rosario, Santa Fe

Congreso; Congreso Latinoamericano y XIV Congreso Argentino de Microbiología (ALAM); 2016

Asociación Argentina de Microbiología

Las infecciones bacterianas por cepasmultirresistentes (MDR) y con extrema resistencia (XDR) de la familia Enterobacteriaceae constituyen unaamenaza creciente y compleja para la salud humana a nivel global. En esteúltimo tiempo se documentó la capacidad de ciertas enterobacterias de ocasionarbrotes intrahospitalarios a través de la dispersión de clones epidémicos MDR portadoresde integrones. Esta situación infectológica origina importantes repercusionesclínicas y terapéuticas, ya que aumenta la morbi-mortalidad nosocomial, limitalas opciones terapéuticas e incrementa la transmisibilidad a otrosmicroorganismos. Los integrones son elementos genéticosmovilizables, claves en la captura y dispersión de genes de resistencia aantibióticos (ATBs) que se encuentran bajo forma de cassettes entre las bacterias gram-negativas. Se han caracterizado más de 130 cassettesde resistencia pertenecientes a todas las familias de ATBs disponibles enel mercado para uso clínico. En este contexto, el conocimiento de la regulaciónde la integrasa de clase 1, IntI1, es esencial para encontrar nuevos blancosterapéuticos que ayuden a mitigar la problemática de la evolución haciafenotipos XDR en el nicho nosocomial. La participación de la enzima ADN adeninametiltransferasa (Dam) como un regulador de la expresión génica, afectando desdela virulencia hasta elementos móviles del genoma, fue parcialmente investigada.En este contexto, nos preguntamos si la enzima Dam modula el mecanismo derecombinación de IntI1, en Salmonella spp.. Por ello nos planteamos comoobjetivo general determinar ycomparar las frecuencias de recombinación de los genes cassettes deresistencia a ATBs (GCRA) relevantes en la clínica médica, entre una cepasalvaje y una mutante dam de Salmonella spp.. Se analizaron 5 GCRA, con y sin secuencias 5?-GATC-3? metilables por la enzima Damen el sitio de recombinación que se localiza río arriba de dicho cassette (attI1 ó attC enestructuras attI1-blaVIM-2-attCblaVIM-2; attCdfrA1-aadA1-attCaadA1 y otros) en ensayosde recombinación mediados por IntI1 en E.coli TOP10, S. Typhimurium LT2 y S. Typhimurium LT2Δdam. Nuestros resultados muestran que las frecuencias derecombinación resultaron iguales entre S.Typhimurium LT2 y E. coli TOP10, locual refleja la cercanía taxonómica entre estas dos especies bacterianas. Interesantemente,identificamos un aumento de más del 100% en las frecuencias de recombinación enla cepa mutante dam respecto de lacepa parental. Estos resultados indican que Dam participaría, de alguna forma,en la regulación de este mecanismo de recombinación teniendo implicancias en ladiseminación de los genes cassettes.