Identificación de un nuevo elemento integrativo y conjugativo presente en el genoma de aislamientos clínicos de Shewanella spp.

GISELA PARMECIANO DI NOTO; MS RAMÍREZ; T LAZZARO; DANIELA CENTRON; S UONG; CECILIA QUIROGA

Rosario

Congreso; ALAM-CAM Congreso Latinoamericano y Argentino de Microbiología; 2016

Shewanella spp. es un bacilo gram-negativo no fermentador de la glucosa diseminado en nichos acuáticos. Shewanella es capaz de desarrollarse en una gran gama de entornos, lo que demuestra su plasticidad metabólica y genética. Esta bacteria puede causar infecciones, por lo que se lo considera un patógeno oportunista emergente. La patogenicidad y la multirresistencia en estas bacterias están relacionadas con la adquisición de elementos móviles, tales com los elementos integrativos conjugativos (ICE). Los ICE son plataformas que codifican, entre otros, genes de virulencia y de resistencia a los antibióticos. Nuestro grupo caracterizó un nuevo ICE en la cepa clínica Shewanella sp. Sh95, denominado ICESh95. El objetivo de este estudio fue determinar la ocurrencia de este ICE en aislamientos clínicos de Shewanella spp. y determinar su estructura y función. Se analizó la presencia de ICESh95 en 10 aislamientos clínicos mediante PCR utilizando cebadores específicos para dos regiones conservadas, el origen de transferencia oriT y el gen setR. Nuestros resultados mostraron que 3 de 10 muestras contenían un ICE; las cepas Sh31, Sh82 y Sh392. Mediantes análisis filogenético del gen 16S rDNA usando el método de maximum likelihood, se observó que Sh31 y Sh82 se agrupan con nuestra cepa de referencia Sh95. Estas bacterias comparten el linaje con cepas ambientales que evidencian el intercambio que ocurre entre nichos clínicos y ambientales. Por otro lado, la cepa Sh392 se agrupa con el linaje S. haliotis/algae, que son responsables de causar infecciones. La caracterización de la zona variable de estos ICEs reveló que la cepa Sh31 contendría un ICE idéntico a ICESh95, el cual contiene un integrón con los genes cassettes dfrA15, y qacH, y un intrón de grupo II clase C-attC. Por el contrario, las cepas Sh82 y Sh392 no poseen estos genes. Esto demuestra la plasticidad de las plataformas de tipo ICESh95. Luego, se evaluó el sitio de inserción de los ICE y su capacidad de movilizarse. Los resultados arrojaron que en los tres casos, estos ICEs se insertaron en el un nuevo sitio, upstream del gen pabA al igual que ICESh95. Los ensayos de escisión y conjugación mostraron que el ICE de Shewanella sp. Sh82 fue el único elemento activo capaz de transferirse a otro organismo con una alta eficiencia.Nuestros resultados comprueban que el género Shewanella puede integrar a su genoma un nuevo elemento integrativo y conjugativo del tipo ICESh95. Estos ICEs son capaces de adquirir integrones y genes de resistencia antibiótica, así como promover su transferencia y diseminación a otras bacterias, lo que los convierte en una potencial amenaza frente a la problemática de la mutlirresitencia cuando bacterias ambientales como Shewanella actúan como vector de propagación.