Análisis de la incidencia de plásmidos de amplio espectro de diseminación portadores de genes blaCTX-M en aislamientos clínicos de Escherichia coli uropatógena

SOFÍA MUCCI; LAURA DERDOY; ALEJANDRA RIVOLTA; DANIELA ARCHUBY; AGUSTINA TANI; CECILIA QUIROGA

Rosario

Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología. XIV Congreso Argentino de Microbiología ALAM-CAM 2016.; 2016

Escherichia coli es un bacilo Gram-negativo anaerobio facultativo que forma parte de la flora intestinal de humanos. Sin embargo algunos clones adquieren genes de virulencia o de resistencia a antibóticos mediante la incorporación de elementos genéticos móviles a su genoma. E. coli uropatógena (UPEC) es una variante patogénica que infecta y coloniza el tracto urinario. En los últimos años se ha observado un incremento de la resistencia antibiótica de las cepas UPEC debido a la adquisición de plásmidos de amplio espectro de diseminación pertenecientes a los grupos de incompatibilidad IncFII, IncN, IncW, IncA/C. Los plásmidos BHR son responsables de transferir genes que confieren resistencia a cefalosporinas de tercera generación, tales como blaCTX-M-15, blaCTX-M-14 y blaCTX-M-2. En Argentina, blaCTX-M-2 es la beta-lactamasa de espectro extendido más frecuente. El objetivo de este trabajo fue tipificar los plásmidos presentes en los genomas de aislamientos de UPEC, identificar los genes blaCTX-M presentes en los mismos, y evaluar su capacidad para diseminar los determinantes de resistencia a otras bacterias hospedadoras. Para ello, se analizaron 21 cepas UPEC procedentes de un hospital público de la ciudad de Buenos Aires resistente a beta-lactámicos de espectro extendido. Mediante la técnica de PCR se pudo determinar que IncF (n=14) fue el plásmido más prevalente en la población en estudio, seguido por IncW (n=10) e IncN (n=2). Se observó la ausencia de plásmido del grupo IncA/C. Asimismo, se determinó la presencia de integrones de clase 1 mediante la detección del gen intI1. Esto resultó en 7 muestras positivas para el integrón, lo que reflejó una baja incidencia del mismo. Todas las muestras positivas para el gen intI1 también dieron resultados positivos para alguno de los plásmidos BHR ensayados. Luego se buscaron los genes blaCTX-M del grupo 1, blaCTX-M del grupo 9 y blaCTX-M-2 para aquellas cepas resistentes a cefalosporinas de tercera generación. Esto reveló una mayor incidencia de los genes blaCTX-M-2 (n=9) y blaCTX-M del grupo 1 (n=8). Solo dos cepas dieron positivo para los genes blaCTX-M del grupo 9. En 6 cepas se observó la co-ocurrencia de genes blaCTX-M de distintos grupos. El análisis de secuencias de algunos productos de amplificación mostró que en esta población se encuentran los genes blaCTX-M-3 y blaCTX-M-15 pertenecientes al grupo 1, y blaCTX-M-14 pertenciente al grupo 9. Por último se evaluó la capacidad de los plásmidos BHR de transferir estos genes de resistencia mediante ensayos de conjugación. Esto reveló que los plásmidos IncF colaboran con la diseminación de la enzima CTX-M-15.Nuestros resultados evidencian la incidencia de los plásmidos BHR en aislamientos UPEC y su colaboración con la diseminación de los distintos genes blaCTX-M, y consecuentemente con la multirresistencia antibiótica. El cambio en la prevalencia de los genes blaCTX-M comprueba la constante adaptación y evolución del genoma bacteriano.