Papel de ligandos de PPARgamma y PPARalpha en el perfil de activación de macrófagos en un modelo murino de Chagas experimental

PENAS FEDERICO; CEVEY ÁGATA; MIRKIN GERARDO; SALES MARÍA ELENA; GOREN NORA BEATRIZ

Posadas

Congreso; 1er Congreso Nacional de Estudiantes de Genética; 2015

Universidad Nacional de Misiones.

Los macrófagos (MФ) juegan un papel crítico en el transcurso de la infección con T. cruzi (Tc). Estas células, al ser infectadas, producen grandes cantidades de citoquinas y mediadores proinflamatorios que, aparte de intervenir en el control del parasitismo tisular, pueden provocar daños en los tejidos. Los Receptores Activados por Factores de Proliferación Peroxisomal (PPAR) son factores de transcripción dependientes de ligandos que han sido implicados en la regulación de la respuesta inflamatoria y en la polarización de MФ hacia un perfil alternativo o antiinflamatorio. Sin embargo, la función que ejercen en la enfermedad de Chagas aún no ha sido del todo esclarecida. Por ello, en este trabajo estudiamos el papel de los ligandos PPAR en el perfil de activación de MФ en ratones infectados con Tc. En primer lugar, determinamos por citometría de flujo (FACS) que más del 75% de las células aisladas son MФ ya que expresan el marcadorF4/80. Luego, demostramos por ensayos de Western Blot (Wb) y Griess que la infección induce la expresión de NOS2 y liberación de NO. Cuando tratamos a las células con 15dPGJ2 o Wy14643, ligandos de PPARgamma y alpha, observamos una inhibición en la expresión y actividad de NOS2, evaluado por qPCR, Wb, Griess y FACS. Además, determinamos la síntesis de NO in situ mediante DAF-FM, donde observamos una intensa fluorescencia en los MФ infectados que disminuye tras el tratamiento con los ligandos PPAR. Además, comprobamos, por qPCR y ELISA, que uno u otro ligando disminuye los niveles de expresión de IL-6, TNF-alpha e IL-1beta. Al evaluar si Wy14643 o 15dPGJ2 promovían cambios en el perfil de los MФ infectados con Tc, observamos, mediante FACS, que ambos aumentaban la expresión de Arginasa I (marcador M2), y disminuían la de NOS2 (marcador M1). Además, comprobamos por qPCR que dichos tratamientos aumentaban la expresión de marcadores de perfil M2 como receptor de manosa, Ym1 y TGF-β en los MФ infectados. Los resultados de este trabajo indican que el tratamiento con agonistas de PPARgamma y PPARalpha dirige a los MФ hacia un perfil M2, inhibiendo marcadamente la expresión de mediadores inflamatorios.