Efecto de la proteína Core del virus hepatitis C (HCV) sobre la regulación de la apoptosis, la proliferación y la inmortalización celular

EGUIBAR N; PERAZZO P; GENTILE EA; CASTILLO AI; DELFINO C; MATHET VL; CUESTAS ML; OUBIÑA JR

Congreso; XI Congreso Argentino de Virología-II Congreso Latinoamericano de Virología.; 2015

El HCV ha sido clasificado en 7 genotipos y múltiples subtipos según el porcentaje de identidad nucleotídica. Se desconoce si la infección por el subtipo 2c tiene un curso evolutivo diferente a la de los más estudiados 1a, 1b (los más prevalentes a nivel mundial) y 4. El subtipo 2c ha sido detectado principalmente en algunos países de Europa y África y en algunos de América incluyendo Argentina. Su prevalencia es significativa en algunas provincias del país, tales como Córdoba y Buenos Aires.Dentro de la región codificante del genoma viral, el gen core contiene la secuencia más conservada entre los diferentes aislamientos y genotipos del HCV, lo que sugiere una importante función biológica. Se han documentado diversas actividades funcionales de dicha proteína viral, incluyendo la encapsidación del RNA viral, la regulación de promotores celulares, las interacciones con proteínas celulares, la promoción del crecimiento celular e inmortalización, la inducción del hepatocarcinoma celular en ratones transgénicos, un rol inmuno-regulador y un controvertido ?y aún no definitivamente establecido- papel regulador de la apoptosis.El objetivo del presente trabajo fue estudiar comparativamente los efectos de la expresión de la proteína Core de los subtipos 1b y 2c del HCV sobre los niveles de expresión de diversas proteínas involucradas en la apoptosis, proliferación celular e inmortalización. Para ello se expresó transitoriamente y en modo independiente la proteína Core de ambos subtipos en células Huh7 y se analizó mediante Western blot con anticuerpos específicos el efecto de la misma sobre las proteínas tanquirasa (activadora de la telomerasa), cIAP1 y cIAP2 (inhibidoras de la apoptosis), procaspasa 3 (ejecutora apoptótica), ganquirina (reguladora anti-apoptótica del ciclo celular) y c-Myc. A las 48 horas de expresión transitoria de la proteína Core de los genotipos 1b o 2c del HCV se produjo una disminución significativa (p < 0,05) de la expresión de tanquirasa (0,5 ± 0,1 y 0,3 ± 0,1, respectivamente), cIAP1 (0,5 ± 0,04 y 0,7 ± 0,1, respectivamente) y procaspasa 3 (0,7 ± 0,05 y 0,2 ± 0,03, respectivamente) pero solamente el subtipo 2c indujo una disminución significativa de ganquirina (0,6 ± 0,2). No se observaron efectos estadísticamente significativos sobre la expresión de cIAP2 y c-Myc. El valor de los controles se designó arbitrariamente como 1.Los resultados obtenidos sugieren que la expresión transitoria de los subtipos 1b y 2c de la proteínaCore del HCV desempeñan in vitro un rol proapoptótico, lo que podría tener importantes implicancias en la patogénesis de la infección natural por HCV. En el modelo experimental utilizado, dicho efecto fue -en algunos casos- genotipo-dependiente, dado que -en general- el mismo fue observado sobre la proteínas regulatorias / efectoras de la apoptosis / inmortalización celular más acentuadamente en las células que expresaron Core del subtipo 2c.