STAPHYLOCOCCUS AUREUS METICILINO RESISTENTE: APROXIMACIONES EXPERIMENTALES AL ANÁLISIS COMPARATIVO DE LA VIRULENCIA DE LOS PRINCIPALES CLONES CAUSANTES DE INFECCIONES ADQUIRIDAS EN LA COMUNIDAD EN ARGENTINA

FERNANDEZ S; LATTAR S; LEDO C; HAIM S; NOTOLLANA M; DI GREGORIO S; GOMEZ MI; SORDELLI DO; MOLLERACH M

Congreso; XIII Congreso Argentino de Microbiología; 2013

Asociacion Argentina de Microbiologia

Staphylococcus aureus meticilino-resistente (SAMR) es un importante agente causal de infecciones de piel y partes blandas (PPB) y de infecciones severas e invasivas.  En Argentina hemos descripto el reemplazo del clon ST5-SCCmecIV-spat311-agrII-LPV+ por el clon ST30-SCCmecIV-t019-agrIII-LPV+ entre aislamientos de SAMR recuperados de PPB e infecciones invasivas adquiridas en la comunidad. Asimismo registramos una asociación significativa entre la presencia del clon ST30 y los casos de infección invasiva (p=0,029, Fisher).  E objetivo de este trabajo fue comparar la capacidad patogénica del clon ST30-IV-t019 respecto del clon ST5-IV-t311.  Se determinó por PCR la presencia de los genes sea seg, sec, sei(enterotoxinas),, hemolisina gama (hlg), un gen implicado en la formación de biopelícula (icaA) y genes de adhesinas (fnbA, fnbB, clfA, clfB y fib).  La producción de hemolisinas alfa, beta y gama se estudió mediante la hemólisis en agar sangre de carnero junto a una estría de S. aureus RN 4220 productor de beta-hemolisina.  Se estudió la producción de biopelícula cultivando las cepas en caldo tripteína soya en microplacas de poliestireno.  Se realizaron ensayos en un modelo de osteomielitis aguda con ratas Wistar adultas. Se inocularon las tibias izquierdas con 1x106 unidades formadoras de colonias (UFC) y luego de 96 horas se evaluó el número de UFC/tibia. Como marcador de daño tisular se midió el índice osteomielítco (IO) de cada tibia infectada.  Se utilizó además un modelo de infección respiratoria adquirida por ruta intranasal en ratones BALB/c de 8 semanas.  La inoculación se realizó con 1x108 UFC en un volumen de 10 µl y a las 4 hs post-inoculación se evaluó la presencia de bacterias en sangre.  Los resultados mostraron que ambos clones portaban los genes sei, seg ,icaA, fnbA, clfB, clfA, hlg y que producían las hemolisinas alfa y delta. El gen fib sólo se encontró en el clon ST5 y el gen fnbB en el clon ST30. No se observaron diferencias significativas en la formación de biopelículas. En el modelo de osteomielitis aguda se recuperó un mayor número de UFC en las tibias desafiadas con el clon ST30-IVc-t019 comparadascon las inoculadas con el clon ST5-IVa-t311 (p=0.0253, Mann Whitney). Los IO fueron significativamente mayores para las tibias infectadas con el clon ST30-IVc-t019 (p=0,0139, Mann Whitney).  En el modelo de inoculación intranasal, la proporción de ratones con bacteriemia fue mayor en el grupo inoculado con el clon ST30 (p<0.05, Fisher).  El clon ST30-IVc-t019 demostró una mayor capacidad patogénica en los dos modelos animales realizados. Por un lado se observó una mejor capacidad del clon ST30-IVc-t019 para establecerse en el nicho óseo y de causar mayor mayor daño de ese tejido, y por otro una mayor capacidad de invasión del epitelio pulmonar causando bacteriemia luego de la inoculación por vía intranasal.  La relevancia de estos hallazgos radica en que se trata del clon de S. aureus actualmente recuperado en la mayoría de las infecciones por SAMR adquiridas en la comunidad en Argentina.