IMPAM   23988
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA MEDICA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
LA ADHESIÓN DE ESCHERICHIA COLI ENTEROAGREGATIVA A LAS CÉLULAS HEP-2 ESTA AFECTADA POR LA EXPRESIÓN DE RPOS
Autor/es:
ALMIRÓN, M.; SANJUAN, N
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVIII REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2013
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
Escherichia coli enteroagregativa (EAEC) es un patógeno asociado a diarreas persistentes cuya prueba de referencia para su diagnóstico es la forma de adhesión a las células HEp-2. El patrón característico es la adherencia agregativa en donde participan fimbrias ya caracterizadas y otras moléculas aún no identificadas. En estudios anteriores hemos demostrado que la proteína de membrana bacteriana OsmY altera el modo en que EAEC se asocia a las células Hep-2 aunque no modifica su capacidad de adhesión e invasión a las mismas. OsmY es una proteína que está regulada por múltiples factores incluyendo al de transcripción RpoS. El objetivo de este trabajo fue investigar si existen otros genes en EAEC regulados por RpoS que puedan afectar su interacción a las células eucarióticas. Para ello se construyó un mutante tomando la cepa prototipo, 17-2, a la que se le transfirió por transducción con el fago P1 la mutación rpoS::Kan de otra cepa de Escherichia coli y se evaluó su fenotipo y comportamiento en ensayos de infección a células Hep-2. El mutante 17-2rpoS::kan presenta un tamaño de célula menor y la deficiencia en la catalasa, características de los mutantes RpoS-. El fenotipo de agregación en cultivos líquidos bacterianos de la cepa patrón está conservado en el mutante. Los ensayos de infección a células Hep-2 se realizaron utilizando una m.o.i de 100 con cultivos de la cepa 17-2 y 17-2rpoS de 18hs de incubación y se efectuaron estudios cuali y cuantitativos de adhesión e invasión. La observación microscópica del patrón de adherencia a las células eucarióticas del mutante en relación a la cepa patrón fue semejante mientras que el porcentaje de células asociada a Hep-2 fue mucho menor (44 ± 11%). En tanto la invasión de ambas se mantuvo en niveles bajos (