IMPAM   23988
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA MEDICA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
CARACTERIZACIÓN INMUNOCITOQUÍMICA Y ULTRAESTRUCTURAL DE LA REPLICACIÓN DEL VIRUS POLIOMA MURINO EN CÉLULAS RENALES
Autor/es:
MATTIONI, L; SANJUAN, P; SANJUAN, N
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVIII REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2013
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
El riñón es el órgano del ratón donde el virus Polioma se amplifica antes de ser eliminado por la orina, que es la fuente de su diseminación en la naturaleza en infecciones agudas y en ratones con neoplasias inducidas por el mismo virus. Los mecanismos subcelulares involucrados en este fenómeno son poco conocidos. El objetivo de este trabajo fue estudiar el proceso de replicación de Polioma en cultivos de células renales y en el riñón entero. Se realizaron cultivos primarios de células tubulares renales de ratones C3H Bi/Da en cubreobjetos de vidrio dentro de placas de Petri, con DMEM más 10% de suero fetal bovino, que fueron infectados por la cepa A2 de Polioma con una MOI de 1 ufp/célula. A las 2, 18, 24 y 48 hs post-inoculación (pì), se fijaron sendos cubreobjetos con metanol, y la presencia de la proteína mayor de la cápside viral, VP-1, fue determinada por inmunofluorescencia indirecta, usando como contraste la inmunomarcación de tubulina. Seis ratones de la misma cepa fueron inoculados subcutáneamente con 106 ufp de A2, sacrificados a los 30 días pi, y los riñones procesados histológicamente. La detección de VP-1 se realizó por inmunoperoxidasa. Tanto los cultivos celulares cuanto los riñones fueron estudiados también por ME. A las 18 hs pi, las células infectadas mostraron vesículas intracitoplásmicas positivas para VP-1, que por ultraestructura, no contenían partículas virales. En el riñón entero se observaron también vesículas intracitoplásmicas, pero repletas de virus. Se concluye que: 1. En el ciclo de replicación in vitro, Polioma sintetiza VP-1 que luego es acumulada en vesículas intracitoplásmicas, antes de su migración hacia el núcleo, donde ocurrirá el ensamblaje en el tiempo 24 hs pi. 2. Una vez ensamblado, el virus alcanza la superficie celular del riñón migrando dentro de vesículas del sistema de endomembranas. En ningún caso se observó ?estallido celular? que es la forma en que ?se acepta- son liberados los virus carentes de envoltura.