IMPAM   23988
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA MEDICA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Análisis de expresión de posibles blancos de microRNAs con expresión diferencial en Echinococcus spp
Autor/es:
MACCHIAROLI N; CUCHER M; KAMENETZKY L; PRADA L; KISS F; CAMICIA F; BREHM K; ROSENZVIT M C
Lugar:
Puerto Madryn
Reunión:
Jornada; XXVII Jornadas Argentinas de Hidatidosis. XXXV Jormadas Internacionales de Hidatidología.; 2012
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Hidatología
Resumen:
ANALISIS DE EXPRESIÓN DE POSIBLES BLANCOS DE microRNAS DIFERENCIALMENTE EXPRESADOS EN Echinococcus spp. Macchiaroli Natalia1*, Cucher Marcela1, Kamenetzky Laura1, Prada Laura1, Kiss Ference2, Camicia Federico1, Brehm Klaus2, Rosenzvit Mara1. 1IMPAM, Facultad de Medicina, UBA. Paraguay 2155. (1121) Buenos Aires. Argentina 2University of Würzburg, Germany *n_makia@hotmail.com La hidatidosis es una enfermedad parasitaria causada por el estadio larvario de una pequeña tenia del género Echinococcus. En Argentina, la hidatidosis quística es una zoonosis con alta prevalencia y representa un importante problema de Salud Pública. Recientemente, nuestro grupo ha reportado la identificación de pequeños RNAs no codificantes, llamados microRNAs, en E. granulosus y ha mostrado que algunos de ellos, como egr-miR-125 y egr-let-7, tienen expresión diferencial de acuerdo al estadio del ciclo de vida. Los microRNAs son moléculas clave en el desarrollo animal y están relacionados con importantes procesos como proliferación y diferenciación celular. Para entender su rol biológico, es importante identificar los genes que ellos regulan. Debido a que los microRNAs son reguladores maestros de la expresión génica, se ha postulado que podrían ser nuevos blancos de intervención contra parásitos. El objetivo de este trabajo fue identificar y analizar la expresión de posibles genes blanco de miR-125 y let-7 en estadios larvarios de Echinococcus spp. y analizar la expresión de dichos microRNAs en ambas especies. Se identificaron mediante una predicción bioinformática posibles mRNAs blancos de los microRNAs miR-125 y let-7 a partir de datos de transcriptómica y genómica de E. multilocularis, Schistosoma mansoni y el platelminto de vida libre Schmidtea mediterranea. Se seleccionaron los mRNAs más probables considerando el tipo de sitio de unión al microRNA y su conservación filogenética en las especies mencionadas. A partir de las secuencias nucleotídicas de los transcriptos identificados, se diseñaron primers específicos y se analizó su expresión en protoescólices y metacestode de E. granulosus y E. multilocularis mediante RT-PCR. Los productos fueron secuenciados para confirmar la identidad de las secuencias amplificadas. Además se analizó la expresión de miR-125 y let-7 en ambas especies mediante RT-PCR con primers stem-loop. Se identificó un potencial blanco de miR-125 cuya secuencia aminoacídica mostró identidad con un receptor nuclear con dos dominios de unión a DNA. Además se identificó un potencial blanco de let-7 cuya secuencia aminoacídica mostró identidad con un receptor de insulina de E. multilocularis. Se detectó expresión de ambos receptores en protoescólices y en metacestode tanto en E. granulosus como en E. multilocularis. En cuanto a la expresión de los microRNAs, se observó que tanto miR-125 como let-7 se expresan en protoescólices de ambas especies, mientras que en metacestode se observó expresión sólo en E. multilocularis En conclusión se mostró por primera vez la expresión de miR-125 y let-7 en E. multilocularis revelando diferencias de expresión con E. granulosus en el estadio metacestode. El resultado indica que estos microRNAs podrían estar implicados en las diferencias de desarrollo entre ambos parásitos. Además, los potenciales blancos identificados de mir-125 y let-7 sugieren que éstos tendrían un rol relacionado al desarrollo del parásito. Nuestros resultados estarían en concordancia con aquellos obtenidos para C. elegans, en el que se ha demostrado que lin-4 (el ortólogo de miR-125) y let-7 regulan el desarrollo larval.