La proteína de adherencia extracelular (Eap) de Staphylococcus aureus no contribuye a la formación de biopelícula inducida por concentraciones subinhibitorias de ciprofloxacina.

DOTTO, CM; GÁNDARA, L; ALVAREZ, LP; BARBAGELATA, MS; MEDINA, L; CASAS, A; BUZZOLA, FR

Buenos Aires

Congreso; 14º Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas; 2012

Objetivo: La formación de biopelícula por Staphylococcus aureus tiene un rol preponderante en la cronicidad de las infecciones. La expresión de los diferentes factores que contribuyen a la formación de la biopelícula depende fundamentalmente de las señales ambientales. La presencia de un antibiótico es en sí misma un estrés ambiental al que S. aureus debe responder modificando el perfil de expresión tanto de adhesinas específicas como de otros factores de virulencia. Las fluoquinolonas han sido utilizadas para el tratamiento de infecciones por S. aureus resistentes a meticilina inclusive. Sin embargo, emergieron aislamientos resistentes a ciprofloxacina (CPX) prontamente. En las últimas décadas, se señaló al locus ica como el responsable de la formación de biopelícula de S. aureus, ya que codifica las enzimas necesarias para la producción del polisacárido de adhesión intercelular (PIA), que promueve la adhesión y la agregación características. Sin embargo, estudios recientes han demostrado que S. aureus puede formar un tipo de biopelícula ica-independiente, indicando que PIA no sería un componente esencial de la misma, sino que, además, existirían otros factores involucrados, como ciertas proteínas de superficie y ADN extracelular. Se demostró que la proteína de adherencia extracelular (Eap) es importante para la adherencia de S. aureus a otras células bacterianas y a las células eucariotas. El objetivo del presente trabajo consistió en establecer la participación de Eap en la formación de la biopelícula inducida por concentraciones subinhibitorias (subCIM) de CPX. Para ello, se utilizó la cepa Newman de S. aureus por expresar niveles elevados de Eap respecto a otras cepas de este patógeno. Resultados: Mediante PCR en tiempo real, se determinó un incremento del transcripto eap luego de la exposición a subCIM de CPX comparado con los niveles hallados en la biopelícula de la cepa Newman sin tratar. Por medio de SDS-PAGE y posterior secuenciación se evidenció el aumento de la proteína Eap luego del tratamiento de la cepa Newman a subCIM de CPX. Por otro lado, se estableció que el tratamiento con subCIM de CPX indujo un incremento significativo de la biopelícula de la cepa Newman comparado al observado en el control (Media±SEM: DO595: 4.35±0.59 [subCIM CPX] vs 3.76±0.25 [control], p