Captación in vitro de 99mTc-Ciprofloxacina por cepas de S. aureus para utilizar en un modelo de osteomielitis experimental.

LEONARDI N; MENDOZA BERTELLI A; LATTAR S; GOMEZ MI; SORDELLI DO; SALGUEIRO MJ; ZUBILLAGA M

Mendoza

Congreso; XLIV Reunión anual de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental.; 2012

El estudio de factores de virulencia asociados a las infecciones por S. aureus es de gran interés en la actualidad. Objetivo: Evaluar la captación de 99mTc-ciprofloxacina en cepas de S.aureus salvajes y mutantes spa- que serán utilizadas en un modelo animal experimental para el estudio del rol de la proteína A en el desarrollo de osteomielitis. Material y método: la 99mTc-ciprofloxacina se obtuvo por marcación con 99mTc eluido a partir de un generador 99Mo-99mTc. El control de pureza radioquímica se realizó por cromatografía en papel Whatman N°1 utilizando MEK como fase móvil. La evaluación de la captación de 99mTc-ciprofloxacina por parte de las cepas de S. aureus USA 300 FRP3757 y Newman salvajes y sus correspondientes mutantes spa- se realizó por determinación de la radiactividad retenida luego de la incubación in vitro durante 30 y 60 min a 37°C con el radiofármaco. Para ello, 15 mCi de 99mTc-ciprofloxacina fueron agregados a microtubos conteniendo 109 UFC de las cepas descriptas. Los resultados fueron expresados como porcentaje de la actividad retenida. Resultados: se obtuvo 99mTc-ciprofloxacina con una concentración de actividad de 2 mCi/mL y 99,9% de pureza radioquímica. Los controles del ensayo de captación mostraron ausencia de radiactividad debido a captación de 99mTcO4- proveniente de eluido por agregado directo o a consecuencia de alguna modificación por los excipientes presentes en la formulación del juego de reactivos frío. La captación de la 99mTc-ciprofloxacina fue de 22,9 ± 6,2 % y 11,8 ± 0.6 % para USA 300 FRP3757 salvaje y de 20,2 ± 2,1 % y 9,4 ± 0.1 % para la mutante USA 300 FRP3757 spa- a 30 y 60 minutos de incubación, respectivamente. Para Newman salvajes y mutantes la captación fue de 47,5 ± 2,92 % y 53,2 ± 2,57 % y de 28,9 ± 0,86 % y 29,7 ± 2,85 % a los 30 y 60 min de incubación, respectivamente. Conclusión: no existen diferencias significativas en la captación de  99mTc-ciprofloxacina entre las cepas salvajes y sus correspondientes mutantes spa-, mostrando mayor retención a 30 min. Estos valores permiten proponer estudios de captación in vivo mediante una metodología de imágenes para evaluar lesiones óseas en animales desafiados con las diferentes cepas.