Alteraciones oxidativas dependientes de la presencia de ácido domoico en la microalga Phaeodatylum tricornutum y el medio extracelular

CABRERA, J.; PUNTARULO S.; GONZÁLEZ PAULA M.

Buenos Aires

Simposio; XII Simposio Argentino de Ficología; 2019

Asociación Argentina de Ficología

El ácido domoico (AD) es una biotoxina marina producida durante las floraciones algales nocivas. La hipótesis del trabajo fue que la exposición a AD en diatomeas expuestas no productoras de toxinas favorece la generación de especies activas que son en parte liberadas al medio extracelular. Se evaluó el efecto del AD sobre el metabolismo oxidativo en el medio de extracelular en las diferentes fases de crecimiento de la diatomea marina P. tricornutum expuesta a AD. Para ello se incubaron microalgas colectadas por centrifugación con 64 μM de AD por 12 min. Luego las microalgas tratadas fueron lavadas con buffer e incubadas con 2′,7′ diclorofluoresceina diacetato (DCFH-DA) 60 min. Posteriormente las células fueron lavadas y centrifugadas. En el sobrenadante, medio extracelular, la producción de especies activas se midió como la velocidad de oxidación de DCFH-DA por fluorometría. En cultivos expuestos en la fase exponencial (EXP) se observó un aumento significativo de la velocidad de oxidación de la DCFH-DA de 3 veces con respecto a sus controles. Para determinar cuál de las especies activas estaba implicada en la velocidad de oxidación del compuesto en fase EXP, durante la incubación con DCFH-DA se agregaron diferentes tipos de atrapadores. Este agregado resultó en una disminución de la producción de especies activas en el medio extracelular (31% con SOD, 59% con CAT, 44% con dimetilsulfóxido, 22% con deferroxiamina), siendo significativamente mayor en presencia de glutatión (98%). Similares perfiles se observaron para las fases de crecimiento lag y estacionaria. Los resultados sugieren que la exposición de P. tricornutum a AD provoca un aumento en la producción de especies activas y una liberación de ellas hacia el medio externo.