Efecto in vitro de flavonoides sobre la función y producción de NO mitocondrial de corazón de rata

IGLESIAS DE; BOMBICINO S; ZAOBORNYJ T; BOVERIS A,; VALDEZ LB

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LIV Reunión científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Los flavonoides son compuestos que se encuentran en plantas, principalmente en frutas y semillas. Se ha mostrado que ejercen un efecto antioxidante debido a su propiedad de atrapar anión superóxido, radical hidroxilo, óxido nítrico (NO) y peroxinitrito. Dado que las mitocondrias son la fuente principal de dichas especies, se comenzó a estudiar el efecto in vitro de concentraciones de flavonoides 1-100 nM (miricetina y catequina) sobre la función mitocondrial de corazón de rata, haciendo hincapié en la producción de NO por la óxido nítrico sintasa mitocondrial (mtNOS). Los efectos descriptos, hasta la fecha, son consecuencia del uso de concentraciones mM de flavonoides, las que no se alcanzarían in vivo. Las ratas fueron sacrificadas, se les extrajo el corazón y se aislaron mitocondrias. Se midió consumo de O2 mediante un electrodo tipo Clark, utilizando malato-glutamato y succinato como sustratos en ausencia o presencia de ADP. La producción de NO se midió en membranas mitocondriales, obtenidas por 3 ciclos de congelamiento-descongelamiento, siguiendo espectrofotométricamente la oxidación de la oxihemoglobina. Resultados preliminares muestran que la miricetina (20 nM) no modifica la respiración en estado 4 medida con malato-glutamato como sustratos (26±0.6 ng-atO/min.mg proteína), mientras que disminuye (35%) la respiración mitocondrial en estado 3, en comparación con el control sin flavonoides (80±2.6 ng-atO/min.mg protein), llevando a una disminución del control respiratorio (3.0 a 2.0). La actividad de mtNOS (1.2±0.1 nmol/min.mg proteína) se redujo 40% como consecuencia de la incubación in vitro de las membranas mitocondriales con miricetina y catequina. Estos resultados sugieren que concentraciones nM de miricetina y catequina inducen un desacople parcial de la fosforilación oxidativa en mitocondrias cardíacas. Asimismo, la reducción de la actividad de mtNOS observada in vitro es compatible con una interacción química directa entre dichos flavonoides y la mtNOS.