Técnicas para la detección de Fe catalíticamente activo: aportes y perspectivas

GALATRO A; ROBELLO E; PUNTARULO S

CABA

Workshop; I Encuentro IBIMOL 2016 Avances en Estudios sobre Toxicología y Metales; 2016

IBIMOL

El conjunto de iones de Fe accesibles para catalizar reacciones de óxido reducción, llamado LIP (labile iron pool), constituye una encrucijada para las rutas metabólicas de los compuestos que contienen Fe. Este "depósito de Fe transitorio" también es llamado "Fe quelable", debido a que los enfoques metodológicos empleados para su detección se basan en el uso de quelantes. Se propone que este pool, compromete a ambas formas iónicas de Fe (Fe2+ + Fe3+) asociadas a diversas poblaciones de ligandos como aniones orgánicos (fosfatos y carboxilatos), polipéptidos y componentes de la superficie de las membranas, entre otros.Para determinar el LIP en el IBIMOL (sede Fisicoquímica) se emplean la Espectroscopía de Resonancia Paramagnética Electrónica (EPR) y la Espectroscopía de Fluorescencia. En ambos casos, se determina el contenido de Fe sin discriminar la especie a la cual el Fe se encuentra unido. La hipótesis que se plantea es que las técnicas empleadas presentan una diferencia cuantitativa en la medición de este pool debido a que la capacidad de detección de las especies de Fe no es la misma. El objetivo del presente trabajo fue analizar comparativamente la capacidad de ambas técnicas para detectar complejos de Fe que formarían parte de la composición del LIP in vivo. Se utilizaron concentraciones fisiológicas (10 μM) de distintos complejos de Fe (Fe-citrato (1:2), Fe-ATP (1:20), Fe-EDTA (1:2), Fe-histidina (1:5), mononitrosilos (monoNICs), dinitrosilos (diNICs)). La técnica de EPR, permitió la detección de todos los complejos de Fe. La técnica fluorométrica permitió la detección de la mayoría de los complejos de Fe, excepto los monoNICs. Estos resultados avalan experimentalmente el concepto de la definición operacional del LIP. Se propone que el empleo simultáneo de ambas técnicas es necesario para describir adecuadamente la composición de este pool sobre todo en situaciones que involucren al óxido nítrico y la subsecuente formación de complejos Fe-NO.