Endotoxemia experimental: análisis del estres oxidativo generado en músculo esquelético mediante quimioluminiscencia en tiempo real

VANASCO, VIRGINIA; EVELSON, PABLO; ALVAREZ, SILVIA

Mar del Plata

Congreso; LIII Reunión Científica Anual de la SAIC; 2008

SAIC

Aunque muchos estudios han reportado la ocurrencia de estrés oxidativo en diferentes modelos de endotoxemia, no se han realizado mediciones en tiempo real y en forma no invasiva para el órgano. El objetivo de este trabajo fue analizar la quimioluminiscencia in situ (QL) para evaluar la concentración en  estado estacionario de especies activas del oxígeno. La QL  es una emisión de luz de baja intensidad en el rango visible, debida principalmente al decaimiento de estados excitados del oxígeno molecular (oxígeno singulete y carbonilos excitados). Ratas hembras Sprague-Dowley (180g), fueron inyectadas ip con LPS (lipopolisacárido 026:B6, 10 mg/kg); luego de 6 hs se realizaron los diferentes análisis en músculo abductor e hígado (con fines comparativos). El análisis de la QL se relacionó con otros parámetros de estrés oxidativo (nivel de sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico-TBARS y contenido de carbonilos) y producción de NO. Se observó un aumento de la QL de 1.4 veces (con respecto al control : 38 ± 3 cps/cm2) en músculo esquelético mientras que la QL de hígado muestra valores controles (control: 14 ± 3 cps/cm2). El análisis espectral de la emisión demuestra que el oxígeno singulete es la principal especie emisora. Estos datos fueron corroborados utilizando aumentadores específicos de señal: DABCO (carbonilos excitados) y biacetilo (oxígeno singulete). El aumento observado en QL de músculo esquelético, en animales tratados, se relacionó con un aumento en los TBARS y producción de NO; el contenido de carbonilos no mostró diferencias significativas. Estas observaciones muestran que la QL de tejido, asociado a otros marcadores de daño oxidativo,  permite un análisis mecanístico válido del estrés oxidativo generado en la endotoxemia experimental.