Óxido nítrico (NO) y estrés oxidativo (EO) durante la endotoxemia experimental en ratas con sobrecarga oral de fructosa (SF)

CARRANZA A; AZICH A; MAYER M; INGARAMO PI; RONCO MT; PEREDO HA; PUYÓ AM; GALLEANO M

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina.

Congreso; LIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

SF es considerado un modelo de síndrome metabólico, cuadro asociado a EO en el cual varios aspectos del metabolismo del NO aún son desconocidos. El objetivo de este trabajo fue estudiar la producción de NO y los indicadores de EO durante la endotoxemia experimental en animales controles y SF. Machos Sprague-Dawley de 180 g fueron fueron tratados durante 14 semanas con solución de F 10% P/V en el agua de bebida (F, n=16) o con agua corriente (C, n=16). Seis horas antes de ser sacrificados 8 animales de cada grupo fueron sometidos a endotoxemia por administración de lipopolisacárido de E. coli (LPS) (ip, 4mg/kg) y los restantes 8 animales de cada grupo fueron inyectados con solución fisiológica, quedando establecidos los grupos C, F, C+LPS and F+LPS. Se determinaron: a) niveles de NO en circulación cuantificando el complejo NO-Hemoglobina en sangre a través de espectroscopía de resonancia paramagnética; b) contenido de nitratos y nitritos plasmáticos (NOx), por reacción de Griess previa reducción enzimática; c)expresión de iNOS en hígado por Western Blott, d) sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) (por fluorometría) y 8-isoprostanos (8-iso) por ELISA en plasma. NO-Hb (UA) NOx (uM) iNOS(UA) TBARS (uM) 8-iso (pg/ml) C <0,5 9,0±0,7 2,5±1,3 0,57±0,07 184±45 F <0,5 13,1±0,6 0,6±0,3 0,51±0,02 192±26 C+LPS 19±2 264±11a 68±3a 0,98±0,03a 3557±400a F+LPS 11±1b 212±18a,b 55±6a,b 0,86±0,08a 2960±620a a significativamente diferente de C y F (p<0,05); b ídem C+LPS (ANOVA) Los resultados muestran que, bajo nuestras condiciones experimentales, SF no afectó la producción de NO ni generó EO basalmente, sin embargo, frente al LPS la inducción de la iNOS y, como consecuencia en los niveles de NO y NOx, fueron significativamente menores en los animales SF con respecto a los controles. Podemos concluir que la respuesta al LPS en relación al NO es diferente en animales SF. Experimentos posteriores serán necesarios para establecer la causa de esta respuesta diferencial.