Detección de mutaciones involucradas en la resistencia a pediculicidas en el piojo de la cabeza (Pediculus humanus capitis)

GONZALO ROCA ACEVEDO; ARIEL CEFERINO TOLOZA

VIlla Martelli, BSAS

Jornada; 1as Jornadas UNIDEF en CITEDEF; 2018

UNIDEF-CITEDEF

El piojo de la cabeza, Pediculus capitis ha estado en contacto con los seres humanos desde elprincipio de la humanidad y es un ectoparásito obligado que causa la Pediculosis. Lasinfestaciones de piojos de la cabeza están distribuidas ampliamente en todo el mundo y se hanincrementado desde el principio de 1990 debido a la poca efectividad de los pediculicidas.El uso y abuso de estos productos que contienen el insecticida piretroide permetrina ha llevadoal desarrollo de poblaciones resistentes. Este insecticida actúa en el sistema nervioso del insectoafectando los canales de sodio sensibles al voltaje. Han sido descriptas 3 mutaciones puntuales(SNP?s) en el gen del canal de sodio (M815I, T917I, L920F) que contribuyen a la resistencia alvolteo (knockdown resistance, kdr).La metodología para detectar estas SNP?s posee los siguientes pasos:- Extraer el material genético de cada insecto mediante un kit comercial con un protocolomodificado.- Amplificar mediante una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) del área del gen delcanal de sodio dependiente de voltaje donde se encuentra la mutación.- Someter el producto de la amplificación a digestión enzimática mediante una enzima derestricción (Sspi). Si se encuentra la mutación presente, la enzima realiza un corte en lasecuencia amplificada.- Tanto el producto de la PCR antes y después de la digestión enzimática deben sersembrados en un gel de agarosa. Se constata la presencia de la mutación si existe unabanda de menor peso molecular a comparación de la banda sin digerir.La metodología descripta identifica estas mutaciones que, de estar presentes, permitirá evaluardistintas estrategias de control que no estén basadas en insecticidas piretroides.