Análisis de penetración cuticular de insecticidas en Triatoma infestans (KLUG) (HEMIPTERA: REDUVIIDAE) mediante un sustrato fluorescente de características piretroides (7- PERMETRATO DE CUMARILO).

SANTO ORIHUELA, PABLO LUIS; VASSENA, CLAUDIA VIVIANA

Posadas

Congreso; IX Congreso Argentino de Entomologia; 2015

Centro de Investigaciones Entomologicas

La resistencia en insectos a las distintas familias de insecticidas puede originarse por modificaciones de los diferentes mecanismos relacionados con la interacción insecto-insecticida. Las más importantes descriptas son las modificaciones que se manifiestan en la absorción, distribución y excreción del insecticida, incluyendo también el metabolismo enzimático principalmente y la acción sobre el sitio blanco del insecticida. Particularmente en la absorción cuticular, puede presentarse una reducción en el ingreso del insecticida a través de la cutícula del insecto debido a diferentes causas. El objetivo de este trabajo fue avanzar en el desarrollo de una metodología para evaluar penetración de insecticidas a través de la cutícula, utilizando como insecto modelo a Triatoma infestans (Klug) (Hemiptera:Reduviidae); principal vector de la Enfermedad de Chagas y con desarrollo de resistencia a insecticidas piretroides demostrado. A fin de evaluar este importante paso en la interacción insecto-insecticida se propuso la utilización del 7-permetrato de cumarilo (7-CP); sustrato sintetizado en el CIPEIN y que presenta similitud estructural con los insecticidas de la familia de los piretroides; siendo un compuesto de tipo éster entre el ácido permetrínico y la 7-hidroxicumarina (7-OHC) y que además brinda una buena sensibilidad en su detección a causa de la fluorescencia emitida por su producto de hidrólisis (7-OHC). Se utilizaron ninfas de primer y quinto estadio provenientes de poblaciones susceptibles y resistentes a insecticidas piretroides, las cuales fueron tratadas vía tópica respectivamente con 0,2 y 5 microlitros de soluciones acetónicas de 7-CP mediante microaplicador. Los controles fueron tratados en forma similar con el solvente solo (acetona). Post-tratamiento y a distintos tiempos (1h y 3h) se extrajo la hemolinfa de las ninfas de quinto estadio tratadas con el objeto de detectar la presencia de 7-OHC en las mismas. Las ninfas de primer estadio tratadas fueron incubadas durante diferentes periodos de tiempos (1h y 3h) y luego se lavaron con solución acetónica (grado técnico). Se determinó la cantidad remanente de 7-permetrato de cumarilo total recuperado en los lavados y en la hemolinfa mediante medición espectrofluorométrica en lector de microplacas con excitación a 390 nm y detección de la emisión a 440 nm. Los lavados y la hemolinfa extraída fueron tratados con solución de hidróxido de sodio para asegurar la completa hidrólisis del sustrato y la determinación de su producto la 7-OHC. La cantidad recuperada en los lavados y detectada espectrofluorometricamente de 7-OHC fue aproximadamente y en promedio a un 0,2% de la cantidad total topicada, mientras que en la hemolinfa no se detectó presencia significativa de 7-OHC. Los resultados obtenidos muestran que una importante fracción del tópico de 7-permetrato de cumarilo es absorbido en la cutícula de T. infestans aunque el mismo no pudo ser hallado en la hemolinfa; sugiriendo que el compuesto podría penetrar y distribuirse en otro tejido del insecto.