CIVETAN   23983
CENTRO DE INVESTIGACION VETERINARIA DE TANDIL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto del virus de la leucosis bovina (BLV) en células epiteliales bovinas infectadas in vitro.
Autor/es:
LENDEZ, PAMELA; MARTINEZ CUESTA, LUCIA; DOLCINI, GUILLERMINA; NIETO FARÍAS MARIA VICTORIA; CERIANI CAROLINA
Reunión:
Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología; 2019
Resumen:
Introducción y Objetivos: El virus de la leucosis bovina (BLV) es un Deltaretrovirus que infectaprincipalmente linfocitos B causando una enfermedad linfoproliferativa en el ganado bovino. El virus afecta larespuesta inmune de los animales infectados y previamente se ha demostrado que puede infectar células delepitelio mamario bovino. Estudios anteriores sugieren que los animales infectados con BLV podrían tener unamayor incidencia de mastitis. El objetivo de este trabajo es analizar el efecto de la infección por BLV sobre laviabilidad y la expresión de ARNm de uno de los receptores tipo Toll (TLR2) en el epitelio mamario bovino antesy después de la exposición in vitro a S. aureus, una de las bacterias que causa mastitis crónica en el ganadobovino.Materiales y Métodos: La línea celular mamaria epitelial bovina MAC-T fue persistentemente infectada conBLV (MAC-T BLV). Para los experimentos de estimulación con bacterias, se utilizó una suspensión de S.aureus ATCC 29213 (OD = 0.3) inactivada por calor. La viabilidad de las células MAC-T y MAC-T BLV fueanalizada por el método de MTT. Para el análisis de expresión de genes, la extracción de ARN se hizo conDirect-zol? RNA MiniPrep Plus (Zymo Research, USA). La transcripción reversa se realizó con iScript? cDNASynthesis Kit (Bio-Rad, California, USA) y la PCR en tiempo real se llevó a cabo usando la mix SsoAdvanced?Universal SYBR® Green Supermix (Bio-Rad, California, USA) en el equipo de Applied Biosystems. Los datos seanalizaron usando LingReg y FgStatisitcs.Resultados: La infección por BLV reduce la viabilidad en un 27,85% comparado con las células no infectadascuando se analiza por MTT. En presencia de S. aureus, la viabilidad de MAC-T BLV se reduce en un 15,38% alas 3 h, un 25,90% a las 6 h y un 26,46% a las 18 h en comparación con las células MAC-T. Las célulasepiteliales mamarias infectadas in vitro con BLV expresan 0,28 veces menos ARNm de TRL2 que el control MACT (p=0,01946); sin embargo, esta diferencia no fue estadísticamente significativa. La expresión de TLR2 estádisminuida 0,28 veces (p=0,029) luego de 3 h de incubación con S. aureus, 0,24 veces (p=0,0428) luego de 6h y 0,58 veces (p=0,0849) luego de 18 h.Conclusiones: La infección por BLV reduce la viabilidad de las células epiteliales mamarias bovinas antes ydespués de la exposición a la bacteria S. aureus. El TLR2 es uno de los TLR más promiscuos respecto a lacapacidad de reconocer patrones de patógenos, probablemente debido a que actúa en combinación con otrosTLRs. La infección de las células epiteliales mamarias bovinas con BLV disminuye la expresión de ARNm deTLR2 cuando las células son expuestas a S. aureus previamente inactivado por calor. Esto, sumado a ladisminución en la viabilidad celular, podría afectar la capacidad de reconocimiento de patógenos en la glándulamamaria y por lo tanto la respuesta inmune de la misma, favoreciendo el desarrollo de mastitis en animalesinfectados con BLV.