Expresión de interferón lambda en tejido nervioso de bovinos infectados con BoHV-1 o BoHV-5

ODEÓN, A; ROSALES, J; MARIN, M; BURUCÚA, M; PEREZ, S. E

Vaquerías

Congreso; XXXVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Virología; 2018

Sociedad Argentina de Virología, Asociación Argentina de Microbiología

Los alfaherpesvirus bovinos (BoHV) tipo 1 y 5 son neuroinvasivos. El BoHV-5 es el agente causal de meningoencefalitis necrotizante en terneros, mientras que el BoHV-1 solo ocasionalmente se lo asocia con cuadros neurológicos. El ciclo de infección de los alfaherpesvirus se caracteriza por etapas de infección aguda, latencia y reactivación. Las neuronas sensoriales del ganglio trigémino (GT) son el principal sitio de latencia y la reactivación del virus latente conduce a la transmisión y diseminación viral. El interferón (IFN) tipo III o IFNλ es un grupo de IFNs recientemente identificados. Los receptores para esta citoquina se localizan en células epiteliales y del sistema inmune, aunque su localización en otros tejidos no ha sido extensamente investigada. Al igual que el IFN tipo I, el IFNλ induce un estado antiviral en las células. Si bien el rol del IFN tipo I en la infección por BoHV ha sido parcialmente estudiado, no existe información respecto al IFN tipo III. El objetivo de este estudio fue determinar y comparar los niveles de expresión del IFNλ3 en sistema nervioso central (SNC) y GT durante la infección aguda de terneros experimentalmente infectados con BoHV-1 o 5. Materiales y Métodos: Se utilizaron terneros de 1 año de edad inoculados intranasalmente con 106.3 DICC50/ml de la cepa Cooper de BoHV-1(n=2) o de la cepa 97/613 de BoHV-5 (n=2). La eutanasia se realizó a los 6 días post-infección (dpi) y se obtuvieron muestras de corteza olfatoria, frontal y posterior, médula oblonga y GT. El ARN se extrajo con Trizol (Invitrogen) y fue cuantificado con un Nanodrop. El ADN genómico se digirió con DNase I (Ambion), se transcribió a cDNA (RT, Applied Biosystems) y la expresión del gen IFNλ3 se cuantificó con la técnica RT-qPCR empleando la MASTER MIX Sybr/ROX(PB-L), siguiendo las indicaciones de cada fabricante. Resultados: Los niveles de expresión de IFNλ3 fueron significativamente superiores (p≤0,05) en GT de los terneros infectados con BoHV-1 y 5 con respecto a los niveles observados en el control. En este tejido, los niveles de expresión en la infección por BoHV-1 fueron 5,5 veces superiores a los detectados para BoHV-5. Por otro lado, en corteza olfatoria y corteza frontal sólo en la infección por BoHV-5 los niveles de expresión fueron significativamente superiores (p≤0,05) a los detectados en el control. Conclusión: La corteza olfatoria y frontal son los sitios preferenciales de replicación del BoHV-5 al acceder al SNC, por lo cual los elevados niveles de expresión de IFNλ3 se corresponden con la respuesta esperada a la replicación del virus en estas áreas del cerebro. Del mismo modo, es probable que la respuesta a IFNλ3 en GT de los animales infectados con BoHV-1 refleje los mayores niveles de replicación viral descriptos en este sitio durante la infección aguda. Aunque se requieren estudios más profundos, estos resultados son los primeros reportes de la expresión de IFNλ3 en tejido nervioso de bovinos infectados con alfaherpesvirus.