DETECCIÓN DE CAMPYLOBACTER FETUS ADHERIDOS A ESPERMATOZOIDES BOVINOS MEDIANTE LA TÉCNICA DE PCR

CAGNOLI CLAUDIA; PASUCCI, J; GALLAND PINARD, M; CHIAPPARRONE M LAURA; CATENA M.

Río Cuarto, Córdoba, Argentina

Otro; XXII Reunión científico técnica; 2018

AAVLD

La campilobacteriosis bovina es una enfermedad infecciosa de transmisión venérea causada por Campylobacter fetus venerealis (CFV) y Campylobacter fetus fetus (CFF), que se caracteriza por producir mortalidad embrionaria y abortos. Es una enfermedad que genera grandes pérdidas económicas, la prevalencia estimada en la provincia de Buenos Aires es del 9,8 - 15,3% (INTA, 2017).El diagnóstico se realiza mediante inmunofluorescencia directa en muestras de esmegma prepucial, de mucus cérvico-vaginal de hembras con fallas reproductivas y de líquido de abomaso de fetos abortados. Esta técnica no permite diferenciar las subespecies, para lo cual debe recurrirse al cultivo, identificación bioquímica y reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Hasta el momento se han descripto varios protocolos de PCR, uno de ellos corresponde a Hum et al. (1997), que se ha utilizado principalmente sobre cultivos puros de Campylobacter fetus pero no sobre muestras clínicas. Para el estudio de esta enfermedad en nuestro grupo de trabajo se han aplicado diferentes modelos experimentales in vivo e in vitro. Los modelos in vitro se basaron en la fertilización de ovocitos bovinos, el cultivo de embriones murinos y los cultivos primarios de células vaginales y uterinas. En ensayos con espermatozoides bovinos se demostró que Campylobacter fetus venerealis tiene la capacidad de adherirse (Chiapparrone et al, 2016). Esto motivó el desarrollo de un modelo in vitro, en el que se evaluaron diversos parámetros espermáticos como indicadores de patogenicidad: vitalidad espermática, integridad y funcionalidad de la membrana plasmática, integridad del ADN, reacción acrosómica y porcentaje de espermatozoides con Campylobacter fetus adheridos. Los resultados indicaron en el 100% de las muestras que un 40-50% de los espermatozoides presentan Campylobacter fetus adheridos (Cagnoli et al, 2017).El objetivo del presente trabajo fue utilizar un kit de extracción y purificación de ADN y un protocolo de PCR para detectar Campylobacter fetus adheridos a espermatozoides bovinos