Heterogeneidad en secuencias río arriba de genes de toxina Shiga subtipo 2a

LUCCHESI, P. M. A.; KRÜGER, A.; BURGÁN, J.

Rosario

Congreso; XXIII CONGRESO LATINOAMERICANO DE MICROBIOLOGÍA XIV CONGRESO ARGENTINO DE MICROBIOLOGIA; 2016

Asociación Latinoamericana de Microbiología. Asociación Argentina de Microbiología

Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC) es un microorganismo que coloniza el tracto intestinal de humanos, causándoles diarreas y graves enfermedades como colitis hemorrágica (CH) y síndrome urémico hemolítico (SUH). La virulencia de estas bacterias se relaciona, principalmente, a la producción de Shiga toxinas (Stx), cuyos genes se encuentran codificados en profagos. Diversos subtipos de Stx han sido descriptos y asociados a distintos riesgos de desarrollar enfermedades. Los fagos portadores de stx presentan una organización similar al fago λ, aunque muestran una enorme diversidad. Los genes stx están ubicados en la región tardía del fago, río abajo del gen que codifica para Q, una proteína antiterminadora que regula la expresión de genes tardíos.El objetivo de este estudio es analizar la heterogeneidad de las regiones flanqueantes río arriba de los genes stx2a de diversas cepas STEC e identificar los alelos del gen Q presentes.Se caracterizaron por PCR un total de 58 cepas STEC, portadoras del subtipo stx2a, sólo o en combinación con otro subtipo, pertenecientes a los serotipos O26:H11 (16), O113:H21 (3), O145:H- (14) y O157:H7 (25), y aisladas de distintos orígenes (bovinos, alimentos, pacientes). Por un lado, se evaluó la cercanía de los genes ninG y Q con stx, utilizando los pares de primers NinG-526/595 y Q-stx-f/595, respectivamente. Por otro lado, se analizaron qué alelos del gene Q presentan los distintos aislamientos: Q933, Q21 y QO111.Se observó que las cepas del serotipo O26:H11 que portaban stx2a como único subtipo stx2 fueron positivas para NinG-526/595, Q-stx-f/595 y para el alelo Q933. Mientras que la cepa O26:H11 portadora de stx1a y stx2a fue positiva para el alelo QO111 y negativa para NinG-526/595 y Q-stx-f/595. Las cepas O113:H21 (genotipos stx2a o stx2a/stx2c) dieron negativas para NinG-526/595 y Q-stx-f/595 y presentaron el alelo QO111. Las cepas O145:H- fueron positivas para NinG-526/595, Q-stx-f/595 y para el alelo Q933, siendo la excepción una cepa que no amplificó ninguno de los Q estudiados. En cuanto a las O157:H7 (genotipos stx2a o stx2a/stx2c), todas resultaron positivas para NinG-526/595, Q-stx-f/595 y para el Q933. Además, una cepa con genotipo stx2a y las cepas con genotipo stx2a/stx2c, presentaron también el alelo Q21 e incluso una de estas últimas presentó los 3 alelos.Nuestros resultados muestran que no hay una relación estricta entre las variables: subtipos de stx, alelos de Q y serotipos de STEC. En cuanto a las cepas que dieron negativas para NinG-526/595, hay evidencia previa de que algunas cepas presentan un inserto entre ninG y stx, en cuyo caso, en las condiciones de esta PCR, dicha región podría no amplificarse. Este estudio destaca la variabilidad de los fagos portadores de stx, y si bien, la heterogeneidad de Q ha sido descrita previamente, son necesarios más estudios para evaluar el papel de los alelos en los niveles de expresión stx y su posible relación con la severidad de la enfermedad.