Caracterización genética de cepas Escherichia coli verotoxigénica y enteropatogénica y comparación de la formación de biofilm en distintos  medios de cultivo.  

PADOLA NL; CACERES ME; ETCHEVERRÍA AI

Rosario

Congreso; XXIII CONGRESO LATINOAMERICANO DE MICROBIOLOGÍA XIV CONGRESO ARGENTINO DE MICROBIOLOGIA IV CONGRESO LATINOAMERICANO DE MICROBIOLOGIA DE MEDICAMENTOS ? CLAMME REUNIÓN DE LA SOCIEDAD LATINOAMERICANA DE TUBERCULOSIS Y OTRAS MICOBACTERIOSIS (SLAMTB); 2016

Asociación Argentina de Microbiología

MA‐0220 Caracterización genética de cepas Escherichia coli verotoxigénica y enteropatogénica y comparación de la formación de biofilm en distintos medios de cultivo.  A Etcheverría, M Cáceres, N Padola CIVETAN‐FCV‐UNCPBA, Tandil, Buenos Aires, Argentina.  Se considera que la mayor parte de los microorganismos puede vivir  formando comunidades denominadas biofilm que pueden desarrollarse sobre  diversidad  de  materiales  y  ambientes,  lo  que  constituye  una  fuente  de  contaminación  especialmente  en  la  industria  alimentaria. Escherichia  coli  verotoxigénica  (VTEC)  y  enteropatogénica  (EPEC)  son  importantes  patógenos  relacionados  con  la  Salud  Pública  que  pueden transmitirse por alimentos contaminados y generar enfermedades tales como diarrea, colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico. Los  principales  factores  de  virulencia  de  VTEC  son  la  producción  de  verocitotoxinas  (VTs)  y  la  intimina  (eae)  responsable  de  la  lesión  A/E (?attaching and effacing?) que  también se encuentra en EPEC. Además, pueden presentar diversos  factores de adherencia y  fimbrias que les permiten la colonización de superficies y la formación de biofilm, como agn43, ehaA y cah que favorecen la agregación celular y la fimbria tipo 1 (fim), que facilita la movilidad. El  objetivo  de  este  trabajo  fue  caracterizar  genéticamente  cepas  VTEC  y  EPEC  de  distintos  orígenes  y  comparar  la  formación  de  biofilm  en medios de cultivo con diferente composición. Se analizó mediante  PCR la presencia de los genes  fimCD, ehaA, agn43 y  cah en dos cepas VTEC  ‐O157:H7 y O103:H2‐ y  dos EPEC atípicas  ‐O108:H9 y O40:NM‐. Se comparó la formación de biofilm en microplacas de poliestireno de 96 pocillos donde las cepas fueron incubadas por duplicado en LB a 37 °C durante 24 h, luego el medio fue renovado en un grupo con LB con glucosa al 0,5% (LBglu) y en el duplicado con medio mínimo con glucosa al 0,8% (M63). La formación de biofilm se determinó mediante la técnica de tinción con Cristal Violeta (0,1%) y la medición de la densidad óptica (DO570). Se detectaron los siguientes perfiles genéticos: VTEC O157:H7 ‐fimCD, ehaA, agn43, cah‐, VTEC O103:H2 ‐fimCD, ehaA, agn43‐, EPEC O108:H9 ‐fimCD‐ y EPEC O40:NM ‐fimCD, agn43‐. En cuanto a la formación de biofilm, se obtuvieron las siguientes densidades ópticas para cada una de las cepas: O157:H7 0,772 (LBglu) y 0,432 (M63); O103:H2 1,923 (LBglu) y 0,652 (M63); O108:H9 2,247 (LBglu) y 0,676 (M63) y O40:NM, 1,324 (LBglu) y 1,069 (M63). Se pudo observar que el gen fimCD estuvo presente en todas las cepas, seguido por agn43 que no se halló en una de las cepas EPEC. El gen ehaA fue encontrado sólo en cepas VTEC y el gen cah fue propio de VTEC O157:H7. Si bien  todas las cepas  formaron biofilm en ambos medios de cultivo, la mayor formación se evidenció en LBglu y sólo EPEC O40:NM formó más biofilm en M63. Cabe destacar que VTEC O157:H7 resultó la menor formadora de biofilm en ambas condiciones.