Comportamiento de cepas argentinas del herpesvirus bovino 4 (BoHV-4) genéticamente divergentes en una infección experimental en terneros

MORÁN, P; VERNA, A; ODEÓN, A; PEREZ, S. E

San Salvador de Jujuy

Jornada; XXI Reunión científico-técnica de la Asociación Argentina de Laboratorios de Diagnóstico Veterinario; 2016

AAVLD

El herpesvirus bovino 4 (BoHV4) estárelacionado a diversas presentaciones clínicas enbovinos. Particularmente se lo asocia con infecciones del tracto reproductivodurante el posparto; asimismo ha sido aislado de animales aparentemente sanos, pudiendo infectardiferentes especies tanto in vivocomo in vitro, incluyendo líneas celulares de origen humano. Los resultadosde infecciones experimentales en bovinos y en otras especies no rumiantes, handemostrado que el BoHV4 puede infectar células de diferentes tejidos yestablecer latencia en linfocitos1, 2.  Apartir de sus primeros aislamientos se consideraron dos prototipos: el americano (tipo DN599) y el europeo (tipo Movar). En Argentina, el BoHV-4 se aisló ycaracterizó en el año 2007 apartir de muestras de mucus cérvico-vaginal (MCV) de vacas que presentaroncuadros de aborto, obteniéndose hasta el momento más de 50 aislamientos. Lascepas caracterizadas se clasificaron en tres grupos filogenéticos diferentes,designados como genotipos 1, 2 y 3. El objetivo de este trabajo fueevaluar la capacidad de infección, la distribución en el organismo y laproducción de alteraciones patológicas de tres cepas filogenéticamentediferentes en terneros infectados experimentalmente. Estas cepas se aislaron enel Servicio de Diagnóstico Veterinario del INTA Balcarce, de MCV de vacas queabortaron. Los animales se inocularonintranasalmente con 20 ml (10 ml en cada orificio nasal) de sobrenadante librede células de las cepas virales, previamente amplificadas en cultivos de Madin-Darbybovine kidney, con un título de 106 TCID50/ml:  ternero 1(t1) cepa 09/508 (genotipo 1), ternero2 (t2) cepa 08/330 (genotipo 2), ternero 3 (t3) cepa 07/435 (genotipo 3) yternero 4 (t4) con MEM como control negativo. Se recolectaron muestras de secrecionesoculares y nasales, suero y linfocitos los días 0, 7, 14 y 21 pos infección (pi),y muestras de órganos luego de la eutanasia el día 21. El genoma viral de lastres cepas fue detectado, mediante nested PCR para el  ORF 253, en médula, nódulotrigeminal y cerebro del t1, en bazo, riñón, linfonódulo retro faríngeo ycerebro del t2 y en linfonódulo pulmonar y cerebro del t3. También se detectó elgenoma de las cepas 330 (días 14 y 21 pi) y 508 (día 21 pi) en linfocitos. Elvirus fue aislado de los hisopados nasales de los días 7 y 14 pi para las cepas330 y 435, y del día 14 pi para la cepa 508. El genoma viral no  se detectó en las muestras del ternerocontrol. No se observaron manifestaciones clínicas en ninguno de los animales. Enel análisis microscópico se observó una leve respuesta inflamatoria mononuclearen la submucosa traqueal y en la cápsula del linfonódulo retro faríngeo, y gliosisleve en ganglio trigémino en el t1. En el t3 se observó leve respuestainflamatoria en el tejido conectivo capsular del linfonódulo pulmonar. Además,se determinó la presencia de neuronas hipercromáticas en la región dorsal dellóbulo frontal y leve satelitosis en la porción del lóbulo piriforme. Estosresultados demuestran que estas cepas del BoHV4 tienen la capacidad dediseminarse en el organismo infectando diferentes tejidos. Si bien no seobservaron manifestaciones clínicas en los animales inoculados este trabajopermitió comprobar que estas cepas argentinas de BoHV4 tienen la potencialidadde infectar células del sistema nervioso a diferencia de otras cepas utilizadasen ensayos experimentales previos1.  1-EgyedL, Ballagi-Pordány A, Bartha A, Belák S. Studies of in vivo distributionof bovine herpesvirus type 4 in the natural host. J Clin Microbiol. 1996; 34:1091-1095.2-EgyedL, Kluge J, Bartha A. Histological studies of bovine herpesvirus type 4 infectionin non-ruminant species. Vet Microbiol. 1997; 51: 283-289.3-FabiánK, Egyed L. Detection of bovine gammaherpesviruses by a nested duplex PCR. JVirol Meth. 2004; 115: 93-98.4-Verna A, Manrique J, Pérez S, Leunda M, Pereyra S, Jones L, et al.Genomicanalysis of bovine herpesvirus type 4 (BoHV-4) from Argentina: High geneticvariability and novel phylogenetic groups. Vet Microbiol. 2012; 160,doi.org/10.1016/j.vetmic.2012.04.039.