CIVETAN   23983
CENTRO DE INVESTIGACION VETERINARIA DE TANDIL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Acción del tratamiento con células madre de médula ósea sobre la matriz extracelular endometrial.
Autor/es:
FUMUSO, E.A.; CARMO, M.T.; HERRERA, M.F.; CANTATORE, S.E.; LANDIM, F.C.; LOMBARDO, D.; FELIPE, A.E.; ROSATTI, J.J.; REDOLATTI, C.; ALVARENGA, M.A.
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Conferencia; XXV Conferencia Internacional de Veterinaria Equina; 2014
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Veterinaria Equina
Resumen:
Las terapias con células madre mesenquimales en equinos se utilizan para tratar inflamaciones agudas y crónicas en tendones, articulaciones y vías respiratorias inferiores. El tratamiento con células madre de médula ósea (BMSC) en yeguas con endometrosis mejoró, la distribución y la densidad glandular. La Alfa-actina de músculo liso (ASMA) es un marcador funcional para los subtipos de fibroblastos que remodelan la matriz extracelular. El presente trabajo evaluó el efecto de la terapia con BMSC sobre el colágeno y la ASMA en el tejido endometrial de yeguas con endometrosis. Dieciocho biopsias endometriales fueron tomadas de nueve yeguas (edad 14-23 años) con endometrosis. Nueve biopsias fueron obtenidas en el día 0 (D0) pre-administración de tratamiento con BMSC autólogas. Un total de 8x10 6 células en un volumen de 0,5 ml se inyectaron siguiendo una línea horizontal desde la punta de un cuerno uterino a la otra en 20 puntos diferentes. Las inyecciones se realizaron por histeroscopia con una aguja diseñada para procedimientos endoscópicos. Sesenta días más tarde (D60) se obtuvo una segunda biopsia de cada yegua. Las biopsias se fijaron en solución Bouin, y luego en etanol al 70 % hasta la inclusión en parafina. Secciones seriadas (4 µ) fueron montadas en portaobjetos. Para la medición de colágeno total se utilizó la técnica de coloración de Picrosirius Red. Para inmunohistoquímica de ASMA, las secciones se incubaron con un clon de actina de músculo liso anti-humano diluido 1/100, a 4 º C overnight. Se utilizó Dako LSAB + kit/HRP, como coloración de contraste hematoxilina de Mayer. Las imágenes fueron capturadas con cámara Leica ICC50HD incorporada a un microscopio Leica DM500 a 20x y 40x, utilizando LASEZ ® fotográfica (Leica Application Suite EZ) Entre 5 y 8 imágenes con 40X se analizaron con Q -Win Plus Leica 2003, fueron capturadas para análisis de imágenes de Colágeno y ASMA. El área marcada (% campo por imagen) se expresó en micras cuadradas. Los datos se analizaron con GraphPad-InStat a través del Test t para datos pareados. Luego del tratamiento las dos variables dieron como resultado un aumento al D60. La intensidad de la tinción de colágeno fue: D0: 151,09 , D60: 179,01 (p < 0,009 ). La ASMA fue: D012,09; D60: 18,35 (p < 0,03 ). Estos resultados indican que el tratamiento con BMSC autólogas modifica la matriz extracelular de endometrio.