Población de receptores a estrógenos alfa y progesterona y expresión de ciclooxigenasa 2 durante el Reconocimiento Materno de la Preñez en llamas

BIANCHI, C.P.; MEIKLE, A.; BENAVENTE, M.A.; ÁLVAREZ, M.; TRASORRAS, V.L.; MIRAGAYA, M.H.; ABA, M.A.

Arica

Congreso; VI Congreso Mundial de Camelidos Sudamericanos; 2012

Facultad de Cs Veterinarias y Pecuarias, Universidad de Chile

INTRODUCCIÓN: El reconocimiento materno de la preñez (RMP) es considerado una interacción entre la madre y el concepto, durante el cual el embrión secreta un factor que actúa como señal para el mantenimiento del cuerpo lúteo y su secreción de progesterona (P4). En las llamas se postula que el RMP debería ocurrir entre los días 8 a 12 post cópula (Aba y col., 2000), sin embargo se desconocen cuáles son los cambios moleculares que ocurren en el endometrio materno en ese momento crítico. El objetivo del estudio fue comparar la población de receptores a estrógenos α (REα) y a P4 (RP) y expresión de la ciclooxigenasa 2 (COX2), enzima limitante en la síntesis de prostaglandina F2α, en el epitelio luminal (EL), glandular (EG) y estroma (Str) del endometrio de llamas vacías versus llamas preñadas. MATERIAL Y MÉTODO: Se utilizaron 18 hembras las cuales se dividieron en dos grupos: Vacías, en las cuales la ovulación de indujo con la inyección de GnRH y se obtuvieron muestras de endometrio a través de biopsias transcervicales al día 8 (n = 5) o 12 (n = 5) post inducción de la ovulación. Los animales del grupo Preñados recibieron servicio con un macho fértil. En 5/9 de los animales la preñez se confirmó por visualización del embrión post lavado uterino al día 8, y en 4/9 animales el diagnóstico de gestación se realizó a través de la determinación de las concentraciones plasmáticas de P4 al día 12 post servicio. En ambos días se recolectaron muestras de endometrio. Se consideró como animal preñado aquel que tenía niveles de P4 superiores a 1 ng ml-1 al día 12 post servicio (Sumar, 1996). Las biopsias fueron procesadas usando la técnica inmunohistoquímica avidina-biotina-peroxidasa para la determinación de cada uno de los receptores y COX2. La expresión de los mismos fue evaluada como porcentaje de Área Positiva en el EL, EG y Str y analizada a través del procedimiento mixto del SAS. RESULTADOS: Ambos receptores se visualizaron en los tres tipos celulares contrariamente COX2 nunca se expresó en Str. Los cambios más significativos fueron reportados en el EL. Se observó un aumento en la población de REα al día 8 y 12 y una disminución en la expresión de los RP y de COX2 al día 12 post inducción de la ovulación en los animales preñados versus los animales vacíos (ver tabla adjunta). Receptor a estrógenos α Día 8 Vacías Día 8 Preñada Día 12 Vacías Día 12 Preñada EL 91,90 ± 0,7a 98,60 ± 0,3b 80,38 ± 2,8a 92,00 ± 1,6b EG 98,00 ± 0,7b 99,00 ± 1,8b 95,60 ± 0,7b 96,17 ± 0,6b Str 34,90 ± 2,3c 51,10 ± 0,8d 38,50 ± 1,9c 27,08 ± 4,0d Receptor a progesterona EL 73,36 ± 0,9a 82,17 ± 2,8a 37,50 ± 4,9b 4,88 ± 2,4c EG 95,40 ± 1,6a 99,00 ± 0,3a 91,69 ± 2,3a 74,50 ± 3,6a Str 25,71 ± 3,6b 34,64 ± 3,1b 28,19 ± 2,0b 14,75 ± 2,6c Ciclooxigenasa 2 EL 73,00 ± 7,4a 70,00 ± 9,8ª 93,70 ± 3,4a 34,20 ± 11,8b EG 34,00 ± 13,9b 52,00 ± 8,3b 42,90 ± 12,0b 43,20 ± 14,5b Los datos son expresados como porcentaje promedio de Área Positiva ± SEM. Letras distintas indican diferencias estadísticamente significativas. DISCUSIÓN Y CONCLUSIÓN: El incremento en la expresión del REα al día 8 y 12 post servicio da un mayor soporte a la hipótesis de que los estrógenos estarían involucrados en la señal de RMP (Powell y col., 2007). La disminución en la población de RP en la preñez temprana se ha sugerido que sería necesaria para inducir la expresión de proteínas encargadas de la implantación embrionaria (Spencer y Bazer, 2004). Asimismo, la menor expresión de COX2 al día 12 post servicio en el EL de los animales preñados podría ser responsable de la disminución de la frecuencia y amplitud de secreción de prostaglandina F2α durante el RMP (Aba y col., 2000). Se puede sugerir que el embrión a través de la liberación de alguna señal, estando probablemente los estrógenos involucrados, induciría una disminución en la expresión de COX2 y de esta manera inhibiría el proceso de luteólisis, permitiendo el rescate del CL y el establecimiento de la preñez. Aba, MA y col. (2000). Anim Reprod Sci. 50, 111-121. Spencer, TE y Bazer, FW (2004) Reprod. Biol. and Endocrinol. 2, 49. Powell, SA y col. (2007) Anim Reprod Sci. 102, 66-75. Sumar, J (1996) Anim Reprod Sci 42, 405-415.